Ad介導(dǎo)G250基因轉(zhuǎn)染DC激活免疫效應(yīng)細(xì)胞治療腎癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文Ad介導(dǎo)G250基因轉(zhuǎn)染DC激活免疫效應(yīng)細(xì)胞治療腎癌的實(shí)驗(yàn)研究姓名：齊桓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師：鄭少斌20070501中文摘要也不一致。目前抗原加載存在著多種手段，常用的策略有：抗原肽致敏D c 及病毒載體攜帶抗原基因轉(zhuǎn)染D c 兩種方式。采用腫瘤抗原肽致敏D c 雖有抗原比較特異，可多次免疫等優(yōu)點(diǎn)，但存在的主要問(wèn)題是：這類(lèi)抗原肽往往半衰期較短，因此需要多次免疫方可獲得良好活性的C T L ，

2、而且轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低下．病素載體攜帶抗原肽基因轉(zhuǎn)染D c ，可使基因在D c 體內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)，從而使D c 獲得持續(xù)而大量的抗原肽刺激，有望解決單純抗原肽轉(zhuǎn)導(dǎo)存在的問(wèn)題。目前轉(zhuǎn)染D c 常用的病毒載體有：逆轉(zhuǎn)錄病毒，腺病毒和慢病毒等。腺病毒載體( A d )是常用的病毒載體之一．腺病毒載體是5 型腺病毒基因重組而成的，由于其E l區(qū)的缺失，致使病毒的復(fù)制缺陷，不會(huì)引起宿主細(xì)胞的損傷或病毒擴(kuò)散。展望與其它病毒載體的不同，腺病毒載體具有許多獨(dú)特的優(yōu)

3、點(diǎn)：①宿主范圍廣，對(duì)人致病性低；②在增殖和非增殖細(xì)胞中感染和表達(dá)基因；③能有效進(jìn)行增殖，滴度高；④不整合到染色體，無(wú)插入突變性；⑤能同時(shí)表達(dá)多個(gè)基因。由于腺病毒載體具有諸多優(yōu)點(diǎn)，因此在研究中越來(lái)越多地被采用．在前期研究的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)了以下三部分研究：( 1 ) 以腎腫瘤相關(guān)抗原G 2 5 0蛋白沖擊D c 誘導(dǎo)特異的C T L ，研究其對(duì)腎癌細(xì)胞株的殺傷情況。( 2 ) 以A d 為載體，將G 2 5 0 基因轉(zhuǎn)染D c 誘導(dǎo)C T L

4、 ，研究其對(duì)腎癌細(xì)胞株的殺傷情況，并與G 2 5 0蛋白誘導(dǎo)組作比較分析。( 3 ) 轉(zhuǎn)染A d ／G 2 5 0 的人樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)C T L 抑制人腎癌細(xì)胞系7 8 6 一O 裸鼠移植瘤發(fā)生與生長(zhǎng)。通過(guò)以上三部分研究，探討以A d 為載體，將腎癌抗原基因轉(zhuǎn)染D c 并誘導(dǎo)C T L ，用于治療腎癌的可行性，在此基礎(chǔ)之上，優(yōu)化制備工藝，為臨床試用于抗原明確的腫瘤治療奠定實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。第一部分6 2 5 0 蛋白致敏的D c 瘤苗體外誘導(dǎo)