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文檔簡介
1、為了探討山羊瓣胃上皮是否表達NHE mRNA及日糧營養(yǎng)對其表達的影響,本試驗利用Genebank中牛的同種亞型NHE1、NHE3 mRNA序列分別設(shè)計引物(NHE1、NHE3),利用RT-PCR試驗方法檢測NHE1、NHE3 mRNA在山羊瓣胃上皮的存在;并進一步分析不同日糧營養(yǎng)水平、日糧因子半胱胺鹽酸鹽對山羊瘤胃、瓣胃上皮NHEmRNA表達的影響,為NHE在反芻動物上的研究提供基礎(chǔ)資料。 1.NHE1、NHE3 mRNA在山羊
2、瓣胃上皮的表達采取山羊瓣胃(瓣頁)組織樣品,利用GeneBank中牛NHE3 mRNA(AJl31764.1)和NHE1 mRNA(U49432)的序列,分別設(shè)計出NHE3和NHEl引物序列,通過RT-PCR的方法,首次檢測到NHE1、NHE3 mRNA在山羊瓣胃上皮組織中表達。NHE1、NHE3序列片段測定顯示其與牛同種亞型之間的同源性分別達到91%、95%。 2.不同日糧營養(yǎng)水平對山羊瘤胃、瓣胃上皮NHE1、NHE3 mRN
3、A表達影響的體內(nèi)研究將8頭斷奶山羊隨機分為試驗和對照兩組,在日糧中添加100g/d和0g/d精料,試驗期為42天。RT-PCR結(jié)果顯示,提高日糧營養(yǎng)對瘤胃、瓣胃上皮NHE1、NHE3mRNA表達有一定促進作用(0.05
4、mmol/L)處理24h,收集組織樣。RT-PCR結(jié)果顯示, IGF-I、丁酸顯著促進瘤胃上皮NHE3 mRNA表達(P<0.05)。 4.日糧因子半胱胺鹽酸鹽對瘤胃、瓣胃上皮NHE3 mRNA表達影響,將8頭2~3月齡斷奶山羊隨機分為試驗和對照兩組,在日糧中分別添加45mg/kg.BW.d和0 mg/kg.BW.d半胱胺鹽酸鹽(CT2000),試驗期為35天。RT-PCR結(jié)果顯示,CT2000顯著促進瘤胃、瓣胃上皮NHE3 m
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