血吸蟲蟲卵高表達蛋白SjE16在固有免疫中的作用研究.pdf

1、蟲卵是血吸蟲的主要致病因素。日本血吸蟲蟲卵發(fā)育成熟的過程中產生大量的可溶性抗原，急性期誘導以粒細胞、巨噬細胞為主的免疫細胞趨化，形成以蟲卵為中心的肉芽腫；慢性期肉芽腫發(fā)生纖維化，進而引起嚴重的并發(fā)癥。以往對血吸蟲蟲卵的相關研究大多以血吸蟲蟲卵可溶性抗原（soluble egg antigens，SEA）為基礎，但SEA成分復雜，難以尋找其中關鍵的致病分子。同時對血吸蟲致病機制的研究大多集中于蟲卵與機體適應性免疫之間的相互作用，對其與固有

2、免疫的相互作用研究較少。蟲卵肉芽腫形成的過程中，粒細胞與巨噬細胞等固有免疫細胞的趨化與活化發(fā)揮著重要的作用，因此研究蟲卵抗原與中性粒細胞和巨噬細胞的相互作用對于深入了解蟲卵的致病機制至關重要。
　　本研究中，我們以蟲卵中特異性高表達的SjE16分子為研究對象，通過畢式酵母真核表達系統(tǒng)和大腸埃希菌原核表達系統(tǒng)對該蛋白分別進行了表達與純化，ELISA對重組蛋白的免疫反應性進行了鑒定。通過制備SjE16的小鼠多克隆抗體，抽提蟲卵及成蟲R

3、NA，分別從蛋白和基因水平檢測了其在蟲卵中的特異性分布。在SjE16對宿主固有免疫反應的作用研究中，我們應用小鼠皮下氣囊模型對SjE16在體內誘導機體炎癥反應的作用進行了探索。并以小鼠原代中性粒細胞和巨噬細胞為細胞模型，在體外研究了SjE16對固有免疫細胞移行與細胞因子分泌功能的影響，對其可能的信號通路進行了初步探索。實驗結果顯示，我們通過真核與原核表達系統(tǒng)成功表達純化了SjE16目的蛋白，重組蛋白具有很好的免疫反應性與免疫原性。SjE