缺氧誘導(dǎo)卵巢上皮性癌血管生成擬態(tài)的研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士后學(xué)位論文缺氧誘導(dǎo)卵巢上皮性癌血管生成擬態(tài)的研究姓名：堯良清申請學(xué)位級別：博士后專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：豐有吉20050701復(fù)旦大學(xué)博士后出站報(bào)告時(shí)應(yīng)用免疫熒光雙重標(biāo)記、透射電鏡等技術(shù)對腫瘤內(nèi)皮樣細(xì)胞的表面特異性抗原、超微結(jié)構(gòu)和a c L D L 吞噬功能進(jìn)行鑒定。1 ．2 結(jié)果缺氧可以誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞S K O V - 3 和E S ．2 轉(zhuǎn)化為內(nèi)皮樣細(xì)胞，并形成腔樣、管狀、分支和網(wǎng)絡(luò)狀等擬態(tài)血管。S K O V - 3

2、內(nèi)皮樣細(xì)胞可以表達(dá)F l k - 1 ，A C l 3 3 ，v W F ；細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣變，表面出現(xiàn)微絨毛樣突起，極少數(shù)細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)膜包裹的顆粒。E S ·2 內(nèi)皮樣細(xì)胞可以表達(dá)F l k ．1 ，C D 3 4 ：細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣變，表面出現(xiàn)微絨毛樣突起，極少數(shù)細(xì)胞出現(xiàn)質(zhì)膜包裹的顆粒；部分細(xì)胞局部胞漿出現(xiàn)D i l 陽性細(xì)胞，具有吞噬a c L D L 功能。在常氧、缺氧同時(shí)應(yīng)用西洛莫司條件下，S K O V - 3 和E S

3、 ．2 細(xì)胞均不能觀察到上述改變。1 ．3 結(jié)論缺氧是卵巢上皮性癌血管生成擬態(tài)的主要誘導(dǎo)因素之一，西洛莫司在體外具有遏制缺氧誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞形成擬態(tài)血管的作用。S K O V - 3 和E S - 2 內(nèi)皮樣細(xì)胞可能來源于卵巢上皮性腫瘤細(xì)胞中的干細(xì)胞，在缺氧的壓力下，向內(nèi)皮細(xì)胞( E C ) 分化的一種腫瘤源性E C 前期細(xì)胞，能表達(dá)部分E C 的特異性抗原、具有E C 超微結(jié)構(gòu)的雛形、可有吞噬a c L D L 功能。第二部分缺氧對卵巢

4、上皮性癌細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲及分化的調(diào)控2 ．1 方法在三維培養(yǎng)條件下，應(yīng)用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法( M T T ) 、F C M 和T r a n s w e l l小室等技術(shù)檢測缺氧條件下卵巢上皮性癌細(xì)胞S K O V - 3 和E s 一2 的增殖、細(xì)胞周期分布、凋亡、侵襲。激光顯微切割將S K O V - 3 和E S ．2 內(nèi)皮樣細(xì)胞分離后，應(yīng)用T R A P 和實(shí)時(shí)定量R T - P C R 技術(shù)檢測腫瘤內(nèi)皮樣細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和