疏筋解毒方阻抑多巴胺能神經(jīng)元變性緩解帕金森病的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：實(shí)驗(yàn)從大鼠行為學(xué)變化、DA代謝途徑以及細(xì)胞凋亡調(diào)控分子方面，研究疏筋解毒方對(duì)6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)誘導(dǎo)PD大鼠模型的防治作用，從而揭示疏筋解毒方對(duì)PD治療作用的可能機(jī)制，為中藥治療PD提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和臨床參考。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)選取Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，隨機(jī)分為五組：假手術(shù)組、模型組、左旋多巴(L-dopamine，LD)組(LD組)、疏筋解毒大劑量組

2、(SJL組)、疏筋解毒中劑量組(SJM組)和疏筋解毒小劑量組(SJS組)。采用腦立體定位黑質(zhì)內(nèi)注射6-OHDA建立PD大鼠模型，分別進(jìn)行了PD大鼠行為學(xué)觀察；應(yīng)用高效液相色譜法(high peformance liquid chromatography，HPLC)檢測(cè)PD大鼠黑質(zhì)紋狀體DA及其代謝產(chǎn)物高香草酸(homovanillicacid，HVA)、3，4-二羥基苯乙酸(dihydroxyphenylaceticacid，DOPAC

3、)的含量；應(yīng)用原位雜交法(in situ hybridization，ISH)檢測(cè)PD大鼠黑質(zhì)紋狀體Bcl-2mRNA/BaxmRNA分布及表達(dá)。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1.疏筋解毒方對(duì)PD大鼠行為學(xué)的影響;
　　 LD組及SJL、SJM組均可以有效緩解PD大鼠的旋轉(zhuǎn)行為，與模型組、SJS組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；SJL、SJM組可以明顯改善PD大鼠的異常不自主運(yùn)動(dòng)，與LD組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.

4、01)。
　　 2.疏筋解毒方對(duì)PD大鼠黑質(zhì)紋狀體DA及其代謝產(chǎn)物的影響;
　　 高效液相色譜結(jié)果：與假手術(shù)組比較其它各組PD大鼠紋狀體內(nèi)DA含量均降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。LD組、SJL、SJM組PD大鼠黑質(zhì)紋狀體DA含量增高與模型組及SJS組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。LD組PD大鼠中腦DOPAC、HVA含量增高，DA/HVA比值降低；SJL、SJM組DOPAC、HVA含量降低，DA/HVA比值回升

5、至正常水平，與LD組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 3.疏筋解毒方對(duì)PD大鼠黑質(zhì)紋狀體Bcl-2mRNA/BaxmRNA表達(dá)的影響;
　　 原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果：其它各組與假手術(shù)組比較PD大鼠黑質(zhì)紋狀體Bcl-2mRNA表達(dá)均明顯增加，具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)；模型組、LD組、SJS組黑質(zhì)致密部BaxmRNA表達(dá)升高，Bcl-2mRNA/BaxmRNA比率降低；SJL、SJM組黑質(zhì)致密部BaxmRNA表達(dá)降低

6、，Bcl-2mRNA/BaxmRNA比率回升至正常水平，與模型組、LD組、SJS組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.疏筋解毒方可以緩解PD大鼠的旋轉(zhuǎn)行為，與LD組不同的是，對(duì)PD大鼠的異常不自主運(yùn)動(dòng)有明顯改善作用，提示疏筋解毒方對(duì)PD大鼠的作用機(jī)制與左旋多巴不同，推測(cè)它可能通過調(diào)節(jié)PD大鼠中腦神經(jīng)調(diào)質(zhì)，調(diào)節(jié)中腦多巴胺受體的分布及敏感性，從而達(dá)到提高中腦DA水平，改善PD癥狀的作用。
　　

7、 2.疏筋解毒方具有保護(hù)黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元的作用，與LD類藥物的替代治療機(jī)制不同，它可能通過促進(jìn)PD大鼠損毀側(cè)黑質(zhì)殘存多巴胺能神經(jīng)元分泌DA，同時(shí)抑制DA分解，從而提高內(nèi)源性兒茶酚胺類物質(zhì)的含量，達(dá)到其治療作用。
　　 3.疏筋解毒方可能在基因調(diào)控層面，通過上調(diào)凋亡抑制因子Bcl-2mRNA，下調(diào)促調(diào)往因子BaxmRNA，提高Bcl-2mRNA/BaxmRNA比率，來調(diào)節(jié)調(diào)亡因子的表達(dá)，從而達(dá)到抑制PD大鼠中腦多巴胺能神經(jīng)