人臍血源性多巴胺能神經(jīng)元移植治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文人臍血源性多巴胺能神經(jīng)元移植治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究姓名：黃仕雄申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：邢詒剛20070516人臍血源性多巴胺能神經(jīng)元移植治療帕金森病的實(shí)驗(yàn)研究博士掌位論文cordb100dd甜vedMSCs，HUCBMSCs)、表面標(biāo)志和BMMSCs相似，同樣具有體外向脂肪、神經(jīng)和成骨細(xì)胞分化的功能。此外HUCBMSCs具有生命力強(qiáng)、來源豐富、使用方便等明顯的優(yōu)點(diǎn)，這充分說明，刪cBMSCs的純化和

2、擴(kuò)增將會(huì)為組織工程和細(xì)胞治療提供新的細(xì)胞來源，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療中擁有廣泛的應(yīng)用前景，其應(yīng)用潛能不可忽視。Nl盯1，是近年來發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞核受體超家族的轉(zhuǎn)錄因子，定位于2q2223，已證實(shí)Nurrl基因的過表達(dá)對(duì)DA能神經(jīng)元的發(fā)育、分化起主導(dǎo)作用。最近的研究進(jìn)一步表明該基因的過度表達(dá)對(duì)于體外培養(yǎng)的中腦神經(jīng)前體細(xì)胞最終向多巴胺能神經(jīng)元的分化起了決定性的作用。其作用機(jī)制尚不明確，主要可能是在中腦分泌的某些特異性的信號(hào)誘導(dǎo)下，激活細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的轉(zhuǎn)

3、錄機(jī)制引起特異性的酪氨酸羥化酶(TH)的表達(dá)。本課題組目前已成功克隆出N硼’l基因，并將該基因轉(zhuǎn)入C172神經(jīng)干細(xì)胞系中，在多種因子的協(xié)同作用下，成功使得該神經(jīng)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元(dopamin盯gicneurom，DNs)分化，腦內(nèi)移植這種分化的DNs后，可明顯有效地改善動(dòng)物的行為，免疫熒光示蹤可見移植后干細(xì)胞可同宿主神經(jīng)元有效的整合。利用壬I【珊MSCs源性的多巴胺能神經(jīng)元重建腦內(nèi)黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)是移植治療帕金森病的目標(biāo)之一本研究

4、的主要目的是誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因刪CBMSCs在相應(yīng)的微環(huán)境的誘導(dǎo)下分化為多巴胺能神經(jīng)元，觀察其在黑質(zhì)紋狀體系統(tǒng)中替代乃至于重建中的作用，從而掌握從人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞分化為巴胺能神經(jīng)元的主動(dòng)權(quán)。目前尚未見此類研究。本課題內(nèi)容分為三部分：1人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和鑒定；2Nurrl基因轉(zhuǎn)染人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為多巴胺能神經(jīng)元；3Nllrrl基因修飾的卸JCBMSCs源性多巴胺能神經(jīng)元移植治療帕金森病的作用。第1章人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的分離