疏筋解毒方抑制黑質(zhì)細(xì)胞凋亡緩解PD的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：實(shí)驗(yàn)從腦病理組織切片、黑質(zhì)部位凋亡細(xì)胞的形態(tài)和數(shù)量以及鈣離子含量的變化方面來(lái)探討疏筋解毒方對(duì)6—羥基多巴胺（6—hydroxydopaminne,6—OHDA）所致帕金森病（Parkinson’s disease，PD）大鼠模型的防治作用，從而揭示疏筋解毒方保護(hù)多巴胺（dopamine，DA）能神經(jīng)元以及對(duì)PD治療作用的可能機(jī)制，為中藥治療PD提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和臨床參考。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)選取Sprague-Dawley

2、（SD）雌雄各半的大鼠，隨機(jī)分為六組：假手術(shù)組、模型組、左旋多巴（L-dopamine,LD）組（LD組）、疏筋解毒方小劑量組（SJS組）、疏筋解毒方中劑量組（SJM組）和疏筋解毒方大劑量組（SJL組）。采用偏側(cè)黑質(zhì)紋狀體6—OHDA立體定位注射術(shù)建立PD大鼠模型，分別進(jìn)行了PD大鼠行為學(xué)觀察；應(yīng)用HE染色法在普通光學(xué)顯微鏡下觀察了腦病理組織切片；應(yīng)用黑質(zhì)致密部DNA末端標(biāo)記法檢測(cè)了凋亡細(xì)胞的形態(tài)及數(shù)量；應(yīng)用甲基百里香酚藍(lán)比色法檢測(cè)了黑

3、質(zhì)紋狀體組織鈣結(jié)合蛋白的含量。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　 1、疏筋解毒方對(duì)PD大鼠黑質(zhì)組織形態(tài)的影響
　　 HE染色結(jié)果：與其它組相比，SJM組大鼠中腦黑質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞較豐富，排列較密集，形態(tài)及體積基本接近正常。
　　 2、疏筋解毒方對(duì)PD大鼠中腦黑質(zhì)神經(jīng)元凋亡的影響
　　 TUNEL染色結(jié)果：關(guān)于凋亡細(xì)胞數(shù)目，各治療組與模型組比較均有顯著性差異，P＜0.01；而中藥組與西藥組比較也有顯著性差異，P＜0

4、.01；且SJM組與其它組比較均有顯著性差異，P＜0.01。關(guān)于陽(yáng)性目標(biāo)面密度比較，SJS組范圍最大，除假手術(shù)組外LD組范圍最小。關(guān)于陽(yáng)性目標(biāo)數(shù)密度比較，除模型組外LD組值最大，除假手術(shù)組外SJM組值最小。
　　 3、疏筋解毒方對(duì)PD大鼠黑質(zhì)紋狀體鈣結(jié)合蛋白含量的影響
　　 甲基百里香酚藍(lán)比色法結(jié)果：LD組與模型組無(wú)差別；SJS組和SJL組與模型組比較有顯著性差別，P＜0.01，但與假手術(shù)組比較也有差別，P＜0.05；而

5、SJM組與模型組有差別，P＜0.05，與假手術(shù)組無(wú)差別。
　　 結(jié)論：
　　 1、中劑量的疏筋解毒方可以有效地改善PD大鼠黑質(zhì)組織的形態(tài)，對(duì)PD中腦神經(jīng)元及神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用。它可能通過修復(fù)受損的神經(jīng)細(xì)胞，恢復(fù)細(xì)胞產(chǎn)生DA的功能，增加體內(nèi)DA的含量，從而達(dá)到DA與Ach兩種神經(jīng)遞質(zhì)的平衡，從根本上改變PD大鼠體內(nèi)的生化代謝狀態(tài)，阻止疾病的進(jìn)程，對(duì)PD大鼠產(chǎn)生一定的腦保護(hù)作用。
　　 2、疏筋解毒方可能對(duì)細(xì)胞氧化