載IL-2磁性納米顆粒靶向治療腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 1、制備一種兼具靶向及緩釋作用的載白介素-2磁性納米顆粒(IL-2-Fe3O4-PLGA)，觀察其表征及性質(zhì)。
　　 2、構(gòu)建S180肉瘤小鼠模型，觀察在體外磁場(chǎng)的作用下IL-2-Fe3O4-PLGA在腫瘤區(qū)的靶向富集和抗腫瘤效應(yīng)。
　　 方法：
　　 1、第一部分
　　 1.1、用復(fù)乳揮發(fā)法制備IL-2-Fe3O4-PLGA，激光粒徑儀和掃描電鏡觀察IL-2-Fe3O4-PLGA大

2、小和形貌。
　　 1.2、運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISAKit)測(cè)定IL-2-Fe3O4-PLGA的包封率、載藥量和體外釋藥特性。
　　 1.3、MTT法測(cè)定其釋放的IL-2的生物學(xué)活性。
　　 2、第二部分
　　 2.1、在體內(nèi)，給50只BALB/c小鼠于皮下注射S180肉瘤細(xì)胞，待腫瘤生長(zhǎng)至約3×3mm3隨機(jī)分組（共5組，每組10只），分別給予不同治療：①外加磁場(chǎng)下給予IL-2-Fe3O4-PLGA，

3、②無(wú)外加磁場(chǎng)下給予IL-2-Fe3O4-PLGA，③給予空載的磁性納米顆粒Fe3O4-PLGA，④給予單純的IL-2，⑤給予生理鹽水為空白對(duì)照組，觀察比較腫瘤的生長(zhǎng)及小鼠生存時(shí)間。
　　 2.2、病理分析：腫瘤組織經(jīng)普魯士藍(lán)染色和HE染色，觀察IL-2-Fe3O4-PLGA在腫瘤區(qū)的富集情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、第一部分
　　 1.1、復(fù)乳揮發(fā)法制備的IL-2-Fe3O4-PLGA，用粒徑儀所測(cè)的尺

4、寸為150-2000nm，主要集中在500-700nm，平均直徑697±0.51nm，經(jīng)掃描電鏡觀察，IL-2-Fe3O4-PLGA呈圓球形,形貌良好。
　　 1.2、ELISA測(cè)定IL-2-Fe3O4-PLGA納米粒包封率為83.76±2.12％和載藥量為[(6.93±0.17)×10-3]％。該納米粒在pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液中能持續(xù)釋放IL-2，15天累積釋放的IL-2的濃度為180ng/ml。
　　 1.3、

5、MTT結(jié)果顯示，載IL-2磁性納米粒吸光度A值和空白對(duì)照組相比明顯增加(P<0.05)，與IL-2陽(yáng)性對(duì)照組相比，吸光度A值略有下降（P＞0.05），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明IL-2在微粒中仍舊有活性，能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖。
　　 2、第二部分
　　 2.1、IL-2-Fe3O4-PLGA加磁場(chǎng)組的瘤體體積小于其它各組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.2、病理結(jié)果：①用普魯士藍(lán)染色觀察，IL-2-Fe3O4-PLGA

6、加體外磁場(chǎng)組可見(jiàn)腫瘤組織內(nèi)大量普魯士藍(lán)染色陽(yáng)性顆粒；②HE染色結(jié)果IL-2-Fe3O4-PLGA加體外磁場(chǎng)組，可見(jiàn)腫瘤組織中出現(xiàn)炎癥細(xì)胞灶。
　　 結(jié)論：
　　 1、成功制備了兼具靶向及緩釋作用的IL-2-Fe3O4-PLGA，IL-2-Fe3O4-PLGA釋放的IL-2具有良好的生物學(xué)活性。
　　 2、通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，在外磁場(chǎng)引導(dǎo)作用下，IL-2-Fe3O4-PLGA組能靶向聚集于腫瘤區(qū)，為靶向治療腫瘤提供了