雙重靶向磁性納米載體的制備及其在腫瘤治療中的應用.pdf

1、藥物傳遞系統(tǒng)(DDSs)為提高化療藥物的抗腫瘤療效發(fā)揮了重要作用，正受到越來越多研究者的關(guān)注?；诔槾判运难趸F納米顆粒(SPIONs)的DDSs是一類具有特殊功能的納米載體，其獨特的磁靶向功能可將納米藥物載體高效集中地富集到病灶部位，增強藥物在腫瘤部位的濃度，降低對正常組織的毒副作用。本論文構(gòu)建了一系列雙重靶向磁性納米藥物載體，考察了在雙重靶向作用下這些磁性藥物傳遞系統(tǒng)(MDDSs)在體內(nèi)外的抗腫瘤活性。
　　論文第二章，依

2、據(jù)不同腫瘤細胞表面葉酸受體(FR)表達程度存在差異的特點，創(chuàng)新性地提出了調(diào)控納米載體表面配體的含量以實現(xiàn)對人宮頸癌細胞(HeLa)靶點最佳配對的設計思路，設計了用連接葉酸(FA)靶分子的普朗尼克F127(PEO-PPO-PEO)表面修飾的超順磁性四氧化三鐵(SPIONs)，通過調(diào)節(jié)材料表面FA配體數(shù)量得到了具有梯度靶向能力的磁性納米顆粒SPIONs-F127-FAx。體外普魯士藍染色、熒光成像、冰凍切片、流式細胞等定性檢測，電感耦合等離

3、子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)定量測定鐵離子含量等實驗數(shù)據(jù)表明，SPIONs-F127表面FA的最佳數(shù)量為2.3×1018～2.5×1018(g·NPs)-1。給荷小鼠乳腺癌細胞(4T1)的BALB/c小鼠注射梯度靶材料后，發(fā)現(xiàn)所有材料都通過FR介導的吞噬作用被4T1細胞攝取，吞噬量與FA數(shù)量呈正相關(guān)，且外加磁場能增強FR介導的吞噬作用。
　　論文第三章，根據(jù)星形磁性膠束在藥物控釋體系中的空缺，構(gòu)建了一種苯硼酸(PBA)靶向及

4、還原敏感響應的星形磁性膠束。該膠束由四臂的聚己內(nèi)酯(PCL)開環(huán)，通過二硫鍵連接一端修飾PBA的聚乙二醇(PEG)以靶向腫瘤細胞表面過表達的唾液酸受體(SA)。通過溶劑揮發(fā)同時載入抗腫瘤藥物阿霉素(DOX)和SPIONs得到星形磁性載藥膠束DOX@M-SPECLss-PBA，較直鏈載藥膠束(DOX@M-PECLss-PBA)具有更低的CMC值，在血液循環(huán)中的穩(wěn)定性更高，還原敏感性更強。將DOX@M-SPECLss-PBA與SA過表達的人

5、肝癌細胞(HepG2)和人宮頸癌細胞(HeLa)以及SA低表達的人乳腺癌細胞(MCF-7)和人肺癌細胞(A549)共培養(yǎng)，定性和定量地考察在有無外加磁場作用下，SA表達各異的腫瘤細胞對材料的吞噬情況。體內(nèi)分布和抑瘤實驗表明，外加磁場和PBA靶向能讓DOX@M-SPECLss-PBA集中富集在腫瘤組織，具有很高的抑瘤效果和生物相容性。TUNEL和CD31染色顯示雙靶向組膠束DOX@M-SPECLss-PBA處理的腫瘤細胞凋亡數(shù)量最多、凋亡

6、率最高，同時顯著抑制了腫瘤血管的再生，進一步地從組織水平證實了DOX@M-SPECLss-PBA對腫瘤組織的治療效果。
　　論文第四章，根據(jù)傳統(tǒng)DDSs在血液循環(huán)中普遍存在提前釋藥的特點，利用介孔二氧化硅(MSN)的高儲存載藥空間，設計了具有還原敏感交聯(lián)網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的納米載體MMSN-S2-PEI-PEG-PBA。釋藥曲線表明，PEI交聯(lián)網(wǎng)絡在血液循環(huán)和細胞外基質(zhì)中呈現(xiàn)關(guān)閉狀態(tài)，能有效避免藥物的突釋，只有進入腫瘤細胞在高濃度谷胱甘肽(

7、GSH)刺激下，網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)迅速脫落，開關(guān)打開，藥物從孔道內(nèi)釋放出來。激光共聚焦(CLSM)和z軸疊加圖像表明，釋放后的藥物能進入細胞核。透射電子顯微鏡(TEM)觀察細胞內(nèi)切片發(fā)現(xiàn)，引用外加磁場可提高HepG2細胞對MMSN-S2-PH-PEG-PBA的攝取，增強細胞毒性。21天的抑瘤數(shù)據(jù)顯示，MMSN-S2-PEI-PEG-PBA對荷小鼠肝癌細胞(H22)的Balb/c小鼠抑瘤率可達到93.1％，具有很高的抗腫瘤活性和生物相容性。H&E和