BRD2核定位信號(hào)的核定位功能和細(xì)胞凋亡始動(dòng)功能的初步研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文BRD2核定位信號(hào)的核定位功能和細(xì)胞凋亡始動(dòng)功能的初步研究姓名：何佳瑾申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：病理與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：李桂源20070501何佳瑾碩士學(xué)位論文 中文摘要第一部分B R D 2 核定位信號(hào)的核定位功能1 ．B R D 2 在不同細(xì)胞系中亞細(xì)胞定位模式B R D 2 是B R D 7 的一個(gè)交互作用蛋白，多方面的證據(jù)支持其功能與B R D 7 密切關(guān)聯(lián)。通過(guò)構(gòu)建含綠色熒光蛋白( G F P ) 標(biāo)簽的B

2、 R D 2真核表達(dá)載體p E G F P ．C 3 ／B R D 2 ，應(yīng)用G F P 介導(dǎo)的亞細(xì)胞定位方法，分別考察B R D 2 在C O S 7 、H e L a 和H N E l 三種細(xì)胞系中的亞細(xì)胞定位模式。結(jié)果表明B R D 2 在三種細(xì)胞系中均定位于細(xì)胞核，以片狀或點(diǎn)狀分布，相對(duì)均勻，沒(méi)有明顯的細(xì)胞種屬特異性。但發(fā)現(xiàn)在B R D 2轉(zhuǎn)染的C O S 7 、H e L a 和H N E l 中，許多細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞核不規(guī)則、濃

3、縮、碎裂等細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象，其中以C O S 7 和H e L a 細(xì)胞最為明顯，支持B R D 2 在上述細(xì)胞中具有細(xì)胞凋亡始動(dòng)功能。2 ．B R D 2 不同截短體的亞細(xì)胞定位模式應(yīng)用綠色熒光蛋白( G F P ) 介導(dǎo)的亞細(xì)胞定位方法，分別考察B R D 2 N 末端( a a 1 - 4 3 5 ) 和C 末端( a a 4 2 8 ．7 9 8 ) 截短體在C O S 7 、H e L a 和H N E l 三種細(xì)胞系中的亞細(xì)胞

4、定位模式和差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，B R D 2N 末端和C 末端均定位于細(xì)胞核，以片狀或點(diǎn)狀分布，相對(duì)均勻，沒(méi)有明顯的細(xì)胞種屬和類(lèi)型特異性。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，在過(guò)表達(dá)B R D 2C ．末端( a a4 2 8 ．7 9 8 ) 的細(xì)胞中，出現(xiàn)細(xì)胞核不規(guī)則、濃縮、碎裂等凋亡現(xiàn)象的細(xì)胞明顯比過(guò)表達(dá)B R D 2 N 末端( a a 1 - 4 3 5 ) 的細(xì)胞多。3 ． B R D 2 一個(gè)新的非典型核定位信號(hào)序列的分離與鑒定B R D 2 是一個(gè)核