膿毒癥患者病例回顧性研究及相關血清標志物研究.pdf

1、目的：
　　1.回顧研究膿毒癥患者臨床病例資料，包括臨床表型、生化指標以及相關病原學特征，探討其對膿毒癥預后的影響及意義。
　　2.高通量方法檢測膿毒癥患者血清中以T細胞相關為主的多細胞因子、趨化因子等水平變化，群體驗證并評價膿毒癥患者的免疫情況以及與疾病的發(fā)展關系。3.分析膿毒癥患者入院期間發(fā)生AKI情況、檢測血清標志物ANGL值和血清IL-8及其和AKI發(fā)生的相關性、預估情況以及兩種臨床快速檢測NGAL方法的比較分析。<

2、br>　　方法：
　　1.采用回顧性、單中心臨床病例觀察研究。連續(xù)選取自2012年1月至2014年8月期間，收住仁濟東院急診科的235例確診為膿毒癥的患者，收集其臨床資料，包括人口學資料、臨床表型描述、各項檢驗學指標及相關細菌學資料。同時進行急性生理學和慢性健康狀況(APACHEⅡ）評分、序貫器官衰竭（SOFA）評分。根據(jù)患者出院結(jié)局分成生存組（n=185）和死亡組（n=50），通過比較分析對有意義的因素進行Logstic單因素及

3、多因素回歸分析；同樣對血培養(yǎng)、痰培養(yǎng)、尿培養(yǎng)結(jié)果進行比較分析以及膿毒癥患者中診斷為肝膿腫患者的穿刺引流液培養(yǎng)進行比較分析。
　　2.選擇112例膿毒癥患者以及體檢中心40例健康體檢患者，采用前瞻性研究，通過Luminex Bio-plex懸液芯片系統(tǒng)檢測多細胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、G-CSF、G-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-10、IL-12、IL-13、IL-17、MCP-1、M

4、IP-1β、TNF-α濃度并對兩組患者進行比較分析。
　　3.選擇35例膿毒癥患者以及正常志愿者對照組8例，采用前瞻性研究，通過免疫增強比濁法和免疫熒光法分別檢測血尿NGAL值，同時對兩種方法預估膿毒癥患者發(fā)生AKI靈敏度、特異度等進行比較分析以及IL-8預估膿毒癥AKI的發(fā)生情況。
　　結(jié)果：
　　1.兩組患者的臨床特征比較結(jié)果顯示死亡組患者發(fā)生意識障礙、腎功能損傷、APACHEⅡ評分、SOFA評分、PCT、動脈乳酸

5、、白蛋白和血肌酐顯著高于存活組（P<0.05），而高密度脂蛋白要明顯低于生存組（P<0.05）。對死亡危險因素進行單因素及多因素回歸分析顯示意識障礙（OR=3.09,1.31-7.27，P<0.05）及APACHEⅡ評分（OR=1.15,1.03-1.27，P<0.01）是膿毒癥死亡的獨立相關危險因素，再以 APACHEⅡ評分來預判死亡作 ROC曲線，曲線下面積為0.7。對兩組患者細菌學分析結(jié)果顯示，死亡組痰培養(yǎng)陽性例數(shù)顯著大于生存組（

6、P<0.05），而兩組在血培養(yǎng)及尿培養(yǎng)中均無顯著性差異（P>0.05）。在血培養(yǎng)陽性的25例病例中，溶血葡萄球菌及肺炎克雷伯桿菌檢出率相對于其他菌屬高，而在痰培養(yǎng)及尿培養(yǎng)中真菌檢出率高，痰培養(yǎng)中金黃色葡萄球菌和屎腸球菌檢出率次于真菌檢出率，尿培養(yǎng)中屎腸球菌檢出率次于真菌檢出率。按照G+、G-及真菌分類，血培養(yǎng)中G+檢出百分比顯著高于G-及真菌（60％vs33.3%vs6.7%，P<0.001）。而在痰培養(yǎng)及尿培養(yǎng)中真菌檢出百分比顯著高于

7、G+及 G-（68% vs48.7% vs23.1%，P<0.001）、（77.8%vs33.3%vs22.2%，P<0.001），肝膿腫在膿毒癥中的發(fā)生率為19.6%(22/112)，肝膿腫引流液檢出菌群僅發(fā)現(xiàn)G-菌，包括肺炎克雷伯桿菌、鮑曼不動桿菌以及銅綠假單胞菌。
　　2.膿毒癥組和正常對照組的血清細胞因子比較顯示細胞因子 IL-1β、IL-5、IL-17濃度在兩組間均無明顯差異（P>0.05），而膿毒癥組趨化因子MCP-1

8、、MIP-1β、IL-8和集落刺激因子G-CSF、G-CSF、TNF-α以及細胞因子IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-7、IL-2、IL-10、IL-12、IL-13濃度顯著高于正常對照組（P<0.05）.
　　3.免疫增強比濁法檢測膿毒癥AKI和膿毒癥非AKI組患者血漿、尿NGAL值并比較分析顯示，膿毒癥AKI組患者入院血ANGL值顯著大于膿毒癥非AKI組（P<0.05），而尿NGAL值在兩組間無顯著性差異。膿毒癥患者與正常

9、對照組患者進行比較分析顯示，膿毒癥組患者血、尿NGAL值均顯著大于正常對照組（P<0.001），免疫熒光法檢測膿毒癥AKI和非膿毒癥AKI組患者血NGAL值比較分析顯示，膿毒癥AKI組患者入院血ANGL值顯著大于膿毒癥非AKI組（P<0.01），同時將所有膿毒癥患者與正常對照組患者進行比較分析顯示，膿毒癥組患者血NGAL值均顯著大于正常對照組（P<0.001)，分別以血NGAL來預判膿毒癥AKI做ROC曲線，免疫增強比濁法預判發(fā)生AKI

10、的曲線下面積是0.71，免疫熒光法預判發(fā)生AKI的曲線下面積是0.795.同時，膿毒癥AKI組患者入院血清IL-8值顯著大于膿毒癥非AKI組（P<0.05），以血清IL-8來預判膿毒癥AKI做ROC曲線，發(fā)生AKI的曲線下面積是0.745。
　　結(jié)論：
　　1.在膿毒癥中，意識障礙、腎功能不全、高APACHEII評分、乳酸升高、低HDL-C、低白蛋白血癥、血肌酐升高均是膿毒癥患者預后不良的的危險因素，意識障礙以及高APACH

11、EⅡ評分是膿毒癥死亡的獨立相關危險因素；在各培養(yǎng)檢出陽性中血培養(yǎng)G+菌檢出率高，痰培養(yǎng)及尿培養(yǎng)中真菌檢出率高，肝膿腫穿刺引流液僅培養(yǎng)出G-。
　　2.膿毒癥組IL-4、IL-6、IL-7、IL-8、G-CSF、G-CSF、IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-12、IL-13、MCP-1、MIP-1β、TNF-α濃度顯著高于正常對照組（P<0.05）。
　　3.血漿NGAL值和血清IL-8高的膿毒癥患者與AKI發(fā)生相關，免