2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、靈芝(Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.Karst.)在我國(guó)已有悠久的應(yīng)用歷史,可用于多種疾病的治療。靈芝的化學(xué)、藥理和臨床等現(xiàn)代研究也證明靈芝具有抑制腫瘤、保肝、調(diào)節(jié)血壓、降血糖、抗病毒、延緩衰老、抗炎等多種作用,其中靈芝的抗腫瘤作用更是近年來(lái)的熱點(diǎn)。由于靈芝的化學(xué)成分十分復(fù)雜,難以得到純化合物進(jìn)行抗腫瘤活性及其作用機(jī)制的研究,限制了靈芝產(chǎn)業(yè)的深入發(fā)展。本研究室運(yùn)用分離純化與體外篩選模型相結(jié)合的方法,分別得

2、到提高免疫功能的活性成分GLIS和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的有效部位GLAI,本論文在前人工作的基礎(chǔ)上對(duì)它們的作用機(jī)制進(jìn)行探討,為將來(lái)的進(jìn)一步研究和開發(fā)建立了基礎(chǔ)。 1.靈芝多糖GLIS的免疫刺激活性研究 靈芝多糖GLIS是經(jīng)過(guò)多步色譜分離純化得到的糖蛋白組分,以前的研究發(fā)現(xiàn)GLIS可以激活淋巴細(xì)胞,并能夠特異性地刺激淋巴B細(xì)胞增殖,增加NK細(xì)胞的活性。本論文在前人工作的基礎(chǔ)上,探討了GLIS對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264.7、小鼠骨

3、髓來(lái)源巨噬細(xì)胞(BMMs)和小鼠淋巴細(xì)胞(MSLs)的免疫調(diào)節(jié)作用,并對(duì)激活巨噬細(xì)胞的作用機(jī)理進(jìn)行了研究。 GLIS處理小鼠巨噬細(xì)胞株RAW264.7后,發(fā)現(xiàn)其形態(tài)發(fā)生了變化,如體積變大,并且形成偽足;同時(shí)發(fā)現(xiàn)GLIS能刺激RAW264.7細(xì)胞呼吸爆發(fā),產(chǎn)生大量活性氧,并刺激RAW264.7細(xì)胞釋放NO,兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明GLIS可激活免疫巨噬細(xì)胞的氧依賴殺傷機(jī)制;GLIS還刺激RAW264.7細(xì)胞增加IL-1β、IL-12p35

4、和IL-12p40細(xì)胞因子mRNA的表達(dá),而細(xì)胞因子TNF-α、IL-6和IL-18 mRNA的表達(dá)則基本無(wú)變化;另外還發(fā)現(xiàn)其分泌TNF-α、IL-1β和IL-12細(xì)胞因子的量明顯增加。 GLIS處理小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞(BMMs)后,也發(fā)現(xiàn)其體積變大,并且形成偽足;同時(shí)GLIS也能刺激BMMs呼吸爆發(fā),產(chǎn)生大量活性氧;并刺激BMMs釋放NO,結(jié)果與RAW264.7細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)相同;GLIS刺激BMMs后相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)也增加,

5、在mRNA水平,IL-6、IL-12p35和IL-12p40明顯增加,TNF-α、IL-1β和IL-18也有所增加。在蛋白水平,TNF-α、IL-1β和IL-12三種細(xì)胞因子的表達(dá)明顯增加。 GLIS還可以可刺激淋巴細(xì)胞增殖,并且可刺激其呼吸爆發(fā)。 研究結(jié)果顯示GLIS通過(guò)激活巨噬細(xì)胞氧依賴殺傷系統(tǒng)及刺激其表達(dá)細(xì)胞因子達(dá)到全面激活免疫功能進(jìn)行抗腫瘤的目的。 2.靈芝三萜GLAI誘導(dǎo)腸癌細(xì)胞凋亡作用研究 靈

6、芝三萜GLAI是通過(guò)活性跟蹤經(jīng)多步分離純化從靈芝子實(shí)體中分離得到的一個(gè)有效部位,對(duì)GLAI的理化性質(zhì)研究發(fā)現(xiàn),其三萜含量為62.8%;HPLC檢測(cè)發(fā)現(xiàn)GLAI含有8個(gè)峰,其中有兩個(gè)峰確定為靈芝酮二醇和丹芝醇A。GLAI對(duì)多種腫瘤細(xì)胞株具有抑制活性,包括小鼠淋巴癌L1210細(xì)胞株、人淋巴癌K562細(xì)胞株、人腸癌SW620細(xì)胞株和人乳腺癌MCF7細(xì)胞株。GLAI處理SW620細(xì)胞后,其細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)明顯的變化,細(xì)胞變圓、皺縮,體積變小,并可觀

7、察到凋亡小體的產(chǎn)生;經(jīng)過(guò)Hoechst3258熒光染色和annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè),證明SW620細(xì)胞發(fā)生了凋亡;研究還發(fā)現(xiàn),GLAI處理SW620細(xì)胞后,凋亡關(guān)鍵酶Caspase-3的活性明顯增高;同時(shí)發(fā)現(xiàn),隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增加,凋亡抑制基因BCL-2 mRNA的表達(dá),逐漸減少;而凋亡促進(jìn)基因BAX mRNA的表達(dá)隨之增加;另外發(fā)現(xiàn),凋亡重要相關(guān)因子P53蛋白的表達(dá)隨著藥物濃度的增加而增加,而凋亡抑制

8、蛋白XIAP則隨著濃度的增加而減少。 研究結(jié)果顯示GLAI能夠通過(guò)激活Caspase-3酶途徑誘導(dǎo)腸癌細(xì)胞SW620凋亡,同時(shí)通過(guò)上調(diào)凋亡促進(jìn)因子的表達(dá),下調(diào)凋亡抑制因子的表達(dá)達(dá)到誘導(dǎo)SW620細(xì)胞凋亡的效果。 綜上所述,靈芝的抗腫瘤作用一方面是通過(guò)靈芝多糖激活免疫細(xì)胞,通過(guò)提高免疫系統(tǒng)的能力來(lái)達(dá)到消除腫瘤的目的;另一方面是通過(guò)靈芝三萜誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,從而達(dá)到消除腫瘤的效果。因此靈芝的抗腫瘤作用可能是多途徑共同作用的結(jié)

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