2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  慢性阻塞性肺疾?。–OPD)是世界上最常見的慢性疾病之一,吸煙是其最常見也是最危險的因素。COPD的一個重要合并癥是肺血管重塑所致的持續(xù)性肺動脈高壓。氧化應(yīng)激與COPD的發(fā)展及加重密切相關(guān)。大量研究證明,Nrf2在吸煙誘導(dǎo)的抗氧化損傷反應(yīng)中起關(guān)鍵作用,同時氧化應(yīng)激與細胞的衰老密切相關(guān),近來研究表明,肺血管重塑與衰老有關(guān)。目前關(guān)于Nrf2在香煙煙霧提取物(CSE)誘導(dǎo)細胞衰老中的作用的研究報道還很少。
  目的:<

2、br>  觀察CSE誘導(dǎo)的人肺動脈內(nèi)皮細胞中Nrf2蛋白及衰老相關(guān)蛋白的表達情況,為深入探討Nrf2在吸煙相關(guān)肺動脈高壓和肺血管重塑中的作用提供新思路與實驗依據(jù)。
  方法:
  采用香煙煙霧提取物(CSE)刺激人肺動脈內(nèi)皮細胞(HPAEC),用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài);CCK-8檢測細胞活性;Western blot檢測Nrf2及其穩(wěn)定蛋白DJ-1、下游抗氧化蛋白血紅素氧合酶1(HO-1)和醌氧化還原酶(NQO1)、衰老

3、相關(guān)蛋白的表達變化;細胞免疫熒光檢測Nrf2、P53、P16蛋白表達變化;采用衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶試劑盒檢測細胞β-半乳糖苷酶的表達變化;應(yīng)用ELISA實驗檢測細胞因子TNFα、MCP-1、TGF-β1、bFGF、IL-6表達水平的變化。
  結(jié)果:
  1、CSE刺激誘導(dǎo)人肺動脈內(nèi)皮細胞形態(tài)學(xué)改變
  隨著CSE濃度升高和刺激時間延長,HPAEC逐漸伸展扁平、細胞間隙增寬、立體感減弱,細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量顆粒和空泡。<

4、br>  2、CSE刺激誘導(dǎo)人肺動脈內(nèi)皮細胞的細胞活性變化
  隨著CSE濃度升高,培養(yǎng)的人肺動脈內(nèi)皮細胞增殖活性逐漸降低,尤其從1.5%CSE開始明顯降低。
  3、CSE刺激誘導(dǎo)人肺動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)的表達變化
  (1)隨CSE濃度升高和刺激時間延長,細胞內(nèi)Nrf2蛋白及其穩(wěn)定蛋白DJ-1表達先增高后降低。
 ?。?)隨CSE濃度升高和刺激時間延長,細胞內(nèi)Nrf2調(diào)控的抗氧化蛋白HO-1、NQO1表達

5、先增高后降低。
 ?。?)隨CSE濃度升高和刺激時間延長,衰老相關(guān)蛋白P53、P21、P16表達逐漸增高。
  4、CSE刺激誘導(dǎo)人肺動脈內(nèi)皮細胞內(nèi)β-半乳糖苷酶表達變化
  隨CSE濃度升高和刺激時間延長,細胞內(nèi)衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶表達逐漸增高。
  5、CSE刺激誘導(dǎo)人肺動脈內(nèi)皮細胞細胞因子表達變化
  隨CSE刺激時間延長,細胞培養(yǎng)基上清內(nèi)細胞因子TNFα、MCP-1、TGF-β1、bFGF、IL-

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