豬繁殖與呼吸綜合征、豬2型圓環(huán)病毒病二聯(lián)基因疫苗的構建及實驗免疫研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為構建豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine Reproductive and Respiratory Sydrome，PRRS)和豬2型圓環(huán)病毒病(Porcine Circovirus type 2 disease，PCV2)的二聯(lián)基因疫苗，將PRRSV長春分離株的ORF5、ORF3基因和PCV2內蒙古分離株的ORF2基因，分別克隆至真核表達載體pIPES啟動子CMV下游，構建成真核表達質粒pIRES-ORF2-ORF5、pIPES-OR

2、F2-ORF5-ORF3。通過Western blotting以及IFA等檢測證明，所構建的2個重組DNA疫苗質粒中的目的基因在真核細胞能進行有效的轉錄，并表達了目的蛋白。 將所構建的2個重組DNA疫苗質粒免疫Balb/c小鼠，檢測了免疫小鼠的ELISA抗體水平、脾T淋巴細胞亞群數量和病毒特異性γ干擾素產生細胞的數量。結果表明，所構建的2個核酸疫苗pIPES-ORF2-ORF5和pIPES-ORF2-ORF5-ORF3均能有效刺

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