豬繁殖與呼吸綜合征病毒E基因重組質(zhì)粒的免疫效果研究.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是一種嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的傳染病，主要引起母豬繁殖障礙和仔豬及生長豬呼吸系統(tǒng)疾病。PRRS病毒(PRRSV)E蛋白是主要的免疫原性蛋白，含有與病毒中和作用相關(guān)的表位，在免疫反應(yīng)中起重要作用。PRRSV E基因被認(rèn)為是亞單位疫苗、重組活載體疫苗和DNA疫苗的首選基因。 為了探討PRRSV E基因的免疫原性，即研究其

2、是否能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體與中和抗體，本研究應(yīng)用了本實驗室構(gòu)建的表達(dá)PRRSV E基因的真核表達(dá)質(zhì)粒pIRES-E，經(jīng)轉(zhuǎn)化后，大量抽提質(zhì)粒，并用質(zhì)粒pIRES-E、空載體pIRESneo、生理鹽水和不同劑量的PRRS弱毒苗分別免疫家兔。另外，用PRRS病毒GXA株接種于長成單層的Marc-145細(xì)胞，待出現(xiàn)病變后，收獲病毒，測其病毒的滴度(TCID50)。本研究挑取18只體重1.5-2.0 kg的雄性健康家兔，隨機(jī)分5組，pIRES-

3、E、空載體pIRESneo組各4只，分別注射質(zhì)粒200μg/只；生理鹽水組4只，注射1 mL/只；1/4頭份PRRS弱毒苗組3只，注射疫苗0.5 mL/只：1/2頭份PRRS弱毒苗組3只，注射疫苗1 mL/只，全部后腿肌肉注射，共免疫2次，首免與二免間隔2周。分別于首免前和首免后不同時間點采血，分離血清，用ELISA和中和試驗進(jìn)行特異性抗體和中和抗體的檢測，結(jié)果表明，免疫pIRES-E質(zhì)粒組家兔均產(chǎn)生了抗PRRSV E蛋白的特異性抗體，