共表達霍亂毒素B亞基的DNA疫苗的系統(tǒng)及粘膜佐劑活性研究.pdf

1、近年來針對HIV的疫苗研究中，包含DNA疫苗的組合應用非常廣泛。DNA疫苗的一個固有缺陷就是相對傳統(tǒng)的蛋白疫苗以及病毒載體疫苗，其免疫原性較弱。在改造DNA疫苗的免疫原性的策略中，有一種方式就是將具有佐劑作用的活性物質與抗原一同整合于質粒載體中?；魜y毒素是霍亂弧菌產生的一種外毒素，是已知最強的粘膜免疫原，其全毒素以及A、B亞基都具有佐劑活性。
　　在本文中，我們嘗試將CTB亞基全長基因和相應抗原融合表達，制成相應的DNA疫苗（以及

2、一些重組痘苗病毒）以及并檢測這些疫苗通過系統(tǒng)及粘膜兩種不同方式接種后，對于相應部位的各種不同免疫反應的影響。
　　1、共表達抗原與CTB的DNA疫苗在系統(tǒng)免疫中的免疫原性使用的疫苗為本實驗室構建的TRIVN、CTB-TRIVN等DNA疫苗[1]，通過肌注免疫的方式，研究其佐劑活性。
　　研究的結果，在T細胞免疫反應和體液免疫兩個方面，CTB-TRIVN的反應都顯著強于單純TRIVN。共表達CTB與TRIVN的DNA疫苗在肌注

3、途徑具良好佐劑活性。
　　2、融合表達抗原與CTB的DNA疫苗在粘膜免疫中的佐劑活性在初步確定了融合表達抗原與CTB的DNA疫苗在傳統(tǒng)的注射型疫苗中的佐劑活性后，進一步考察融合表達抗原與CTB的DNA疫苗的粘膜佐劑活性。
　　研究的結果:無論是在系統(tǒng)（脾細胞）還是在粘膜（近端、遠端和腸系膜淋巴結），通過OVA-CTB rTTV加強的抗原特異性T細胞反應均強于單純OVArTTV加強。而體液免疫方面則無顯著差異。
　　我們

4、還研究了抗原特異性T細胞表面有細胞遷移與歸巢相關分子表達狀況(α4β7與CCR9)，在各組之間沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異。
　　本論文的主要意圖在于通過將CTB直接嵌入載體與抗原共表達的方式提高響應DNA疫苗在系統(tǒng)及粘膜免疫途徑中的免疫原性。研究結果表明，CTB共表達的DNA疫苗通過肌注途徑免疫可以引發(fā)較良好的抗原特異性細胞及體液免疫反應;在粘膜免疫方面，通過DNA疫苗滴鼻初免+相應重組痘病毒肌注加強的策略，新形式的疫苗+佐劑組合可以在系統(tǒng)