以霍亂毒素B亞基為佐劑開發(fā)AO型口蹄疫雙價(jià)粘膜多肽疫苗的研究.pdf

1、口蹄疫(Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV)引起的烈性傳染病，其爆發(fā)、流行會帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前國際上常用的口蹄疫疫苗為滅活疫苗，但是如果滅活不完全可能會導(dǎo)致病毒傳染。因此需要開發(fā)一種安全有效的新型口蹄疫疫苗。FMDV的VP1蛋白含有多個(gè)重要的抗原表位，能有效的誘發(fā)FMDV特異的免疫反應(yīng)，因此針對VP1設(shè)計(jì)的疫苗是當(dāng)前FMDV疫苗研

2、究的熱點(diǎn)。粘膜免疫系統(tǒng)是抵抗病原微生物入侵的重要屏障。FMDV作為一種傳染性疾病，粘膜IgA對動(dòng)物抵抗病毒的入侵可能也具有不可忽視的作用。經(jīng)由粘膜途徑免疫的FMDV疫苗具有良好的應(yīng)用前景CT是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的粘膜佐劑，但具有較大毒性，而其B亞基(CTB)具有很強(qiáng)的抗原呈遞能力，添加痕量的CT或單獨(dú)使用就具有很好的佐劑活性。因此利用以CTB為主的混合佐劑來研制抗A、O型FMDV的雙價(jià)粘膜疫苗具有較大實(shí)用意義。 本研究主要工作是選擇

3、合適的載體原核表達(dá)A、O型抗原決定簇和HBcAgeDNA融合基因(融合基因先前已由本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)完成，命名為t8-3s)，表達(dá)純化霍亂毒素B亞基(CTB表達(dá)載體有本實(shí)驗(yàn)室張國廣構(gòu)建)。同時(shí)構(gòu)建CTB-t8-3s融合表達(dá)載體。將上述三個(gè)蛋白表達(dá)純化后做蛋白的活性或免疫原性檢測。然后將CT、t8-3s混合物和CTB-t8-3s分別經(jīng)皮下、鼻粘膜、口服途徑免疫小鼠。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)t8-3s可以誘發(fā)抗口蹄疫標(biāo)準(zhǔn)抗體的抗體，說明它具有開發(fā)成口蹄疫疫苗的