霍亂毒素B亞基和小麥小孢子特異表達(dá)β-expansin基因的表達(dá)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、在本文中，霍亂毒素B亞單位與多角體蛋白的融合基因被克隆至昆蟲桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)(BEVS)的轉(zhuǎn)移載體pBacPAK8中，使其置于多角體蛋白(polyhedrin)基因啟動(dòng)子控制之下，獲得重組轉(zhuǎn)移載體pBacPAK-mCTB。重組轉(zhuǎn)移載體DNA與經(jīng)Bsu36I酶切線性化的修飾型病毒Bm-BacPAK6DNA共轉(zhuǎn)染家蠶BmN細(xì)胞，然后經(jīng)空斑純化、PCR擴(kuò)增、Southem雜交等方法鑒定出含CTB基因的重組病毒BacPAK-mCTB。將重組

2、病毒BacPAK-mCTB感染BmN細(xì)胞及五齡幼蟲，SDS-PAGE電泳分析顯示重組桿狀病毒的116kD的β-半乳糖苷酶條帶缺失，證實(shí)外源基因已成功取代了LacZ基因；Westernblotting分析發(fā)現(xiàn)在14kD及70kD處有分別都有明顯條帶?！　”疚脑谛←溞℃咦犹禺惐磉_(dá)階段，經(jīng)基因組DNA提取、RT-PCR、Northem及Southern技術(shù)，首次鑒定出了一個(gè)小麥小孢子特異β-expansincDNA-TaEXPB2cDNA。

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