家蠶表達(dá)的霍亂病毒B亞基融合蛋白防治1型糖尿病和阿爾茨海默癥研究.pdf

1、1型糖尿病(Type1 diabetes，T1D)和阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease，AD)是威脅人類健康的兩大疾病，二者之間存在著密切的聯(lián)系。免疫療法已被證明是一條有潛在應(yīng)用前景的防治T1D和AD有效方法。
　　第一部分 口服家蠶表達(dá)的胰島素和谷氨酸脫羧酶65雙抗原防治1型糖尿病研究
　　1型糖尿病(Type1 diabetes，T1D)是一種由T細(xì)胞介導(dǎo)胰島β細(xì)胞損傷的自身免疫性疫病。通過(guò)口服自身抗原

2、誘導(dǎo)粘膜免疫耐受是預(yù)防和治療T1D的有效方法。然而誘導(dǎo)口服耐受需要大量抗原，而且功效很低，這就限制了口服耐受在臨床上的應(yīng)用。在本研究中，我們?cè)O(shè)計(jì)了包含胰島素，三拷貝的谷氨酸脫羧酶65 p531-545多肽和霍亂病毒B亞基融合蛋白（CTB-Ins-GAD/CTB-GAD-Ins），通過(guò)家蠶生物反應(yīng)器高效表達(dá)了該融合蛋白，并評(píng)價(jià)該融合蛋白對(duì)T1D的保護(hù)作用。我們的研究結(jié)果表明口服CTB-Ins-GAD可以抑制78％T1D，比單獨(dú)口服胰島素或

3、者GAD65更有效?？诜﨏TB-Ins-GAD可以誘導(dǎo)胰島素和GAD65特異性的Th2型的免疫反應(yīng)，更有利于修復(fù)Th1/Th2免疫失衡，另外，CTB-Ins-GAD可以誘導(dǎo)更多的CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞來(lái)抑制胰島素和GAD65反應(yīng)性T細(xì)胞的增殖和遷移。我們的研究結(jié)果表明聯(lián)合雙抗原結(jié)合家蠶生物反應(yīng)器能促進(jìn)口服耐受的誘導(dǎo)，因此，為T1D的治療提供了一條經(jīng)濟(jì)有效的免疫療法。
　　第二部分 口服家蠶表達(dá)的霍亂毒素B亞基與

4、雙重Aβ42融合蛋白防治阿爾茨海默癥研究
　　阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease，AD)的主要病理學(xué)特征包括腦中神經(jīng)細(xì)胞外β-淀粉樣多肽沉積形成的老年斑，細(xì)胞內(nèi)過(guò)度磷酸化Tau蛋白導(dǎo)致的神經(jīng)纖維纏結(jié)。Aβ是老年斑的主要成分，腦內(nèi)出現(xiàn)病理性的Aβ沉積是患AD的標(biāo)志。主動(dòng)或者被動(dòng)免疫清除Aβ是目前被廣泛研究的有很大潛力的治療AD的方法。然而，用Aβ主動(dòng)或者被動(dòng)免疫提高了患腦膜炎或者引起腦出血的風(fēng)險(xiǎn)。在本研究中，我們通

5、過(guò)家蠶生物感應(yīng)器高效表達(dá)了包含霍亂病毒B亞基和兩個(gè)拷貝的Aβ42的融合蛋白(CTB-(Aβ42)2)，并評(píng)價(jià)了該融合蛋白對(duì)AD的保護(hù)作用。我們的研究結(jié)果表明口服CTB-(Aβ42)2誘導(dǎo)非致炎的Aβ42特異性的Th2型免疫反應(yīng)，顯著地降低了Aβ水平，老年斑面積和Tau蛋白的磷酸化水平，改善AD小鼠的記憶和認(rèn)知功能，但是沒(méi)有引起IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10等細(xì)胞因子水平的變化。我們的研究認(rèn)為CTB-(Aβ42)2對(duì)AD有治療