枯草芽孢桿菌淀粉酶定向進(jìn)化及對(duì)玉米粉水解效果的研究.pdf

1、α-淀粉酶在工業(yè)化生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛。它能水解淀粉形成小分子糖類如麥芽糖等。幾乎在食品工業(yè)的各個(gè)方面都會(huì)用到α-淀粉酶。但是在α-淀粉酶實(shí)際應(yīng)用的過程中,由于受到酶本身?xiàng)l件的限制,酶的活性還有待提高,并且高溫及強(qiáng)酸強(qiáng)堿等極端條件對(duì)酶活性的也有很大的影響。因此,獲得高活性及耐酸堿的α-淀粉酶,對(duì)目前飼料工業(yè)及食品工業(yè)的發(fā)展都具有重要的意義。很多研究者都使用生物技術(shù)的方法來提高α-淀粉酶的活性,易錯(cuò)PCR技術(shù)是目前應(yīng)用最為廣泛的基因定向進(jìn)化手段

2、之一。本研究采用易錯(cuò)PCR技術(shù),對(duì)枯草芽孢桿菌的α-淀粉酶基因進(jìn)行體外誘變。
　　易錯(cuò)PCR方法簡單,操作簡便,近幾年成為基因體外定向進(jìn)化的新策略。本實(shí)驗(yàn)從實(shí)際操作中驗(yàn)證了這一方法的可行性,并為研究枯草芽孢芽孢桿菌α-淀粉酶基因突變位點(diǎn)與酶功能的關(guān)系提供了材料,從而為枯草芽孢桿菌α-淀粉酶的后續(xù)研究提供理論上的參考和依據(jù)。
　　本試驗(yàn)采用基因體外定向進(jìn)化策略中 PCR基因誘變技術(shù)。通過改變PCR體系中Mg2+和Mn2+濃度及