糖尿病大鼠甲狀腺組織NF-κB、TNF-α、Bax、Bcl-2表達(dá)的變化.pdf

1、目的：糖尿?。╠iabetes millitus，DM）是一種由多因素引起的以慢性高血糖為特征的全身代謝性疾病，同時(shí)存在著胰島素以外的多種內(nèi)分泌異常。近年流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿?。═2DM）患者甲狀腺形態(tài)及功能異常發(fā)生率較正常人群高，DM大鼠血清游離甲腺原氨酸（FT3）、游離甲狀腺素（FT4）水平較正常大鼠降低，但DM狀態(tài)下甲狀腺功能低下的具體機(jī)制尚不清楚。核因子-κB（NF-κB）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）與多種DM并發(fā)癥關(guān)系

2、密切，且可以影響甲狀腺功能，凋亡在多種DM并發(fā)癥中起重要作用，但是其在DM甲狀腺功能損傷中的作用尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過用免疫組織化學(xué)方法測定DM狀態(tài)下甲狀腺組織NF-κB、TNF-α、Bax、Bcl-2表達(dá)的變化，探討DM大鼠甲狀腺功能損傷的可能機(jī)制。 方法：成年雄性Wistar大鼠（210-255g）14只，隨機(jī)分為兩組：對照組（N組）6只和DM組8只。N組給予普通飼料喂養(yǎng)，DM組給予高脂飼料喂養(yǎng)，8周后以鏈脲佐菌30mg/k

3、g鼠尾靜脈注射造模，N組鼠尾靜脈注射同等劑量檸檬酸緩沖液。72小時(shí)后DM組大鼠血糖均大于16.65mmol/L，造模成功。成模后12周處死兩組大鼠，留取甲狀腺組織在10％的中性福爾馬林固定、脫水、透明、浸蠟后包埋、切片，對甲狀腺組織進(jìn)行NF-κB、TNF-α、Bax、Bcl-2免疫組織化學(xué)染色，之后光鏡下觀察四個(gè)指標(biāo)的表達(dá)變化，用圖像分析系統(tǒng)測定兩組NF-κB、TNF-α、Bax、Bcl-2染色陽性面積比和平均光密度的變化。 結(jié)

4、果：①實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，DM組體重較N組減低（P<0.01），DM組血糖高于N組（P<0.01）②免疫組織化學(xué)分析：光鏡下觀察NF-κB染色示N組甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞核染色為陰性，DM組甲狀腺上皮細(xì)胞核內(nèi)染色呈陰性或弱陽性，較正常組增多。圖像分析結(jié)果：DM組大鼠甲狀腺組織NF-κB、TNF-α免疫組織化學(xué)染色陽性面積比和平均光密度均較N組升高（P<0.05），DM組Bax染色陽性面積比較N組增加，兩組間Bax染色平均光密度比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。DM

5、組Bcl-2免疫組化染色陽性面積比和平均光密度均較N組減低（P<0.05）。DM組Bcl-2/Bax的陽性面積比和平均光密度比均較N組下降（P<0.001）。 結(jié)論：①短期高脂飼料喂養(yǎng)聯(lián)合一次尾靜脈注射小劑量STZ可以成功制備T2DM大鼠模型。②DM組大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞Bax表達(dá)增加、Bcl-2表達(dá)減少、Bcl-2/Bax顯著下降，DM狀態(tài)下甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞凋亡增多，是甲狀腺損傷的可能機(jī)制之一。③DM組大鼠甲狀腺組織表達(dá)TNF