米諾環(huán)素對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡及bcl-2、bax表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 觀察早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織形態(tài)的變化與神經(jīng)細(xì)胞凋亡及bcl-2、bax的表達(dá)，探索米諾環(huán)素（minocycline，MNC）對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bcl -2、Bax表達(dá)的影響，研究米諾環(huán)素對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)保護(hù)機(jī)制，對(duì)米諾環(huán)素在糖尿病視網(wǎng)膜疾病中抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡提供新的理論依據(jù)。
　　 方法：選擇健康成年雄性SD大鼠60 只,隨機(jī)分成正常對(duì)照組、糖尿病對(duì)照組和米諾環(huán)素治療組,每組20只。腹腔內(nèi)注射鏈脲佐菌素

2、(STZ)誘發(fā)大鼠糖尿病。米諾環(huán)素治療組給予米諾環(huán)素腹腔注射（45mg/kg）,共注射10d,模型組和對(duì)照組腹腔注射等體積生理鹽水, 于給藥后4周和8周后的3組動(dòng)物，分別取每組各10只動(dòng)物處死，取其眼球，制備視網(wǎng)膜石蠟切片, 采用末端脫氧核糖核酸介導(dǎo)生物素化脫氧尿嘧啶缺口末端標(biāo)記（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTpNick End Labeling，TUNEL)法進(jìn)行凋亡細(xì)

3、胞原位標(biāo)記,行視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞凋亡計(jì)數(shù),行免疫組化染色, 并對(duì)染色結(jié)果行計(jì)算機(jī)圖像分析，測(cè)每組 Bcl-2、Bax的表達(dá)，對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果擬用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)制備視網(wǎng)膜超微病理切片，在透射電鏡下,行超微結(jié)構(gòu)觀察。
　　 結(jié)果：同一觀察時(shí)間點(diǎn)，Bax 在正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞見(jiàn)弱表達(dá)；在糖尿病組神經(jīng)細(xì)胞有強(qiáng)表達(dá),表現(xiàn)為胞質(zhì)中棕黃色顆粒增加,顏色加重；Bax 在米諾

4、環(huán)素治療組的表達(dá)較糖尿病組降低（p<0.01), 表現(xiàn)為顆粒減少、顏色變淺。Bcl-2 在正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞見(jiàn)弱表達(dá),在糖尿病組有較強(qiáng)表達(dá)；Bcl-2 在米諾環(huán)素治療組的表達(dá)較糖尿病組增強(qiáng)（p<0.01)；在不同觀察時(shí)間，糖尿病組與米諾環(huán)素組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Bcl-2表達(dá)差異無(wú)顯著性（p>0.05)，Bax表達(dá)8周較4周增多，差異有顯著性（p＜0.01)。同一觀察時(shí)間，與正常對(duì)照組比較,糖尿病對(duì)照組視網(wǎng)膜凋亡細(xì)胞增多(p<0.

5、01),在米諾環(huán)素組,大鼠視網(wǎng)膜凋亡細(xì)胞比糖尿病組減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05), 電鏡下正常組:視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞胞膜完整,染色質(zhì)分布均勻,線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)含量豐富,嵴清楚。糖尿病組:神經(jīng)細(xì)胞胞膜皺縮,胞質(zhì)濃縮,核固縮,染色質(zhì)邊集現(xiàn)象明顯,線粒體腫脹,嵴模糊不清或空泡變。米諾環(huán)素治療組:神經(jīng)細(xì)胞無(wú)明顯改變,胞膜完整,核周間隙正常,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列較整齊,線粒體輕度腫脹,嵴模糊不清,染色質(zhì)疏松。
　　 結(jié)論：米諾環(huán)素能有效降低有