復(fù)方血栓通抗糖尿病視網(wǎng)膜病變神經(jīng)細胞凋亡的動物研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文復(fù)方血栓通抗糖尿病視網(wǎng)膜病變神經(jīng)細胞凋亡的動物研究E x p e r i m e n t a l s t u d yo ft h eE f f e c to fF u f a n gX u e S h u a n T o n ga g a i n s t t h e a p o p t o s i So fR e t i n a l N e u r o n c y t e i n D R專 業(yè) 眼科學(xué)申請人 陳瀟導(dǎo)

2、師 于強教授答辯摭佃輜蛾緲．厴鶴 場移髯= j ≮蹲本課題由廣東省東莞市科技局提供基金資助中山大學(xué)中山眼科中心廣州·中國2 0 0 7 年5 月2 3 日，。÷。；復(fù)方血栓通抗精尿病視網(wǎng)膜病變神經(jīng)細胞弼亡的動物研究治療組：糖尿病大鼠，接受復(fù)方血栓通( 9 0 0 m g ／k g ／d a y ) 治療；實驗進行到第1 2 周的時候，做如下處理：( 1 ) 視網(wǎng)膜消化鋪片研究：每組取6 只動物，麻醉后取其一只眼球進行

3、石蠟包埋、切片，H E 染色進行病理形態(tài)觀察，節(jié)細胞計數(shù)以及內(nèi)核層厚度測量；( 2 ) 采用熒光免疫組織化學(xué)的方法檢測視網(wǎng)膜組織中C a s p a s e - 3 的表達量；( 3 ) 提取視網(wǎng)膜組織的蛋白，采用分光光度法檢測各組動物視網(wǎng)膜組織中C a s p a s e ．3 的活力；用W e s t e r n ．B l o t 的方法檢測組織中B c l ．2 以及B a x 蛋白的表達量；( 4 ) 提取視網(wǎng)膜組織當(dāng)中的R N

4、 A ，反轉(zhuǎn)錄，P C R ，電泳以檢測組織中B c l ．2以及B a x 在R N A 水平的表達。結(jié)果：( 1 ) 各組大鼠的一般情況正常組：正常組大鼠精神正常，毛色光亮，運動靈活。對照組：對照組大鼠可觀察到精神倦怠、萎靡，毛色枯槁，“三多一少”癥狀明顯。治療組：同對照組一樣表現(xiàn)出精神萎靡，毛色枯槁，“三多一少”癥狀也很明顯。( 2 ) 視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變H E 染色：正常組大鼠視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)清楚，層次分明，排列整齊，各級神經(jīng)細胞大

5、小均勻；節(jié)細胞層排列整齊，胞核清楚，染色深，內(nèi)核層約5 - 6 層細胞，胞核清楚，染色深，排列緊湊。對照組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞排列紊亂，數(shù)目減少，細胞空泡樣變，核固縮，部分核溶解。內(nèi)外叢狀層變薄，內(nèi)核層變薄，細胞數(shù)目減少，排列紊亂，染色不均勻。治療組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞排列紊亂，數(shù)目有所減少，較對照組增多。少量細胞出現(xiàn)空泡樣變，內(nèi)核層輕度變薄，內(nèi)外叢狀層厚度未見明顯改變。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞計數(shù)發(fā)現(xiàn)正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞為( 2 1 ．

6、6 5 ±2 ．1 3 ／H P ) ，對照組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)目明顯變少( 1 5 ．5 6 ±1 ．1 3 ／H P ) ，治療組相對對照組有所增多( 1 8 ．8 7 ±1 ．2 9 ) 。視網(wǎng)膜內(nèi)核層厚度測量發(fā)現(xiàn)正常組的大鼠內(nèi)核層為( 1 5 ．5 6 ±1 ．4 7 p m ) ，對照組相對正常組變薄( 1 0 ．7 0 ±1 ．3 1 I l m ) ，而治療組的大鼠視網(wǎng)