煙酸對染矽塵大鼠肺組織TNF-α、TGF-β1、NF-κB表達的影響.pdf

1、目的：闡明飼料中添加煙酸對染矽塵大鼠不同時間點肺組織腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)化生長因子-β1和核因子-κB表達以及Ⅰ、Ⅲ型膠原形成的影響。 方法：本實驗采用清潔級Wistar大鼠144只，隨機將之分為3個實驗組，即對照組(氣管滴入0.9％NaCl,普飼)、染矽塵組(氣管滴入50mg/ml矽塵混懸液，普飼)和煙酸組(氣管滴入50mg/ml矽塵混懸液，2.5％(wt/wt)煙酸飼料)。氣管暴露法建立大鼠矽肺模型。模型建立前3d開始，煙酸

2、組給予含2.5％(wt/wt)煙酸的飼料，如此直到將動物處死。模型建立后，每組分1d、3d、7d、14d、21d和28d6個時間點分別取8只大鼠將其處死。計算肺臟器系數(shù)，用肺組織普通石蠟切片HE染色觀察大鼠肺組織矽結(jié)節(jié)。用高效液相色譜法測定血清中煙酸含量，用組織芯片儀制作組織芯片，用免疫組織化學(xué)SP法觀察組織芯片TNF-α、TGF-β1、NF-κB、的表達，天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原。用Image-ProPlusVe

3、rsion5.0forwindowsTM圖像分析系統(tǒng)進行定量分析。 結(jié)果：(1)煙酸組的血漿煙酸濃度各時點都高與對照組和染矽塵組，均有顯著性差異。(2)染矽塵大鼠各時間點肺組織臟器系數(shù)高于對照組；各時間點煙酸組與染矽塵組間均無顯著性差異。(3)在各時點，染矽塵組TNF-α陽性細胞積分光密度均高于對照組，1d時開始升高，7d時達高峰。在3d、7d、14d和21d有差異顯著性。煙酸組各時間點的TNF-α陽性細胞積分光密度均低于染矽塵

4、組，7d時有差異顯著性。(4)染矽塵組大鼠肺組織TGF-β1積分光密度7天時大量增加，與對照組比較有顯著性差異，14d-28d時開始下降，但仍有顯著性差異。與染矽塵組相比，煙酸組陽性細胞積分光密度均下降，14天時與矽肺組比較有顯著性差異。(5)與對照組比較，染矽塵組不同時間點肺組織NF-κB陽性細胞積分光密度均高于對照組，除1d、7d均有差異顯著性。1d時開始升高，14d時達高峰。煙酸組于各時間點的NF-κB陽性細胞積分光密度低于染矽塵

5、組，14d和21d有差異顯著性。(6)染矽塵組各時間點Ⅰ型膠原面積百分與對照組比較呈進行性增加，3d開始明顯升高，高峰是在28d時間點，7d、14d、21d和28d時有顯著性差異。煙酸組Ⅰ型膠原面積百分比于各時間點明顯低于染矽塵組，28d時有顯著性差異。染矽塵組與對照組Ⅲ型膠原面積百分比相比，各時間點的百分比均高于對照組，除1d、3d外均有顯著性差異。Ⅲ型膠原于大鼠染矽塵后1d開始升高，28d時達高峰。煙酸組與染矽塵組比較，除1d外，其

6、他時間點煙酸組Ⅲ型膠原面積百分比減小，21d和28d時有顯著性差異。 結(jié)論：本實驗發(fā)現(xiàn)：1.飲食中添加煙酸能夠明顯提高血漿煙酸濃度。2.煙酸能夠抑制矽塵誘導(dǎo)的肺組織TNF-α、TGF-β1、NF-κB的表達和Ⅰ、Ⅲ型膠原的增加有抑制作用。3.在矽肺的發(fā)生過程中，NF-κB、TNF-α、TGF-β1表達與纖維化階段Ⅰ、Ⅲ型膠原的形成可能有一定的相關(guān)性。首先，TNF-α、TGF-β1、NF-κB的表達先于Ⅰ、Ⅲ膠原的大量增生；其次，