辛伐他汀對膿毒癥大鼠肺組織NF-κB和iNOS表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 通過觀察辛伐他汀(Simvastatin,Sta)對膿毒癥大鼠肺組織不同時(shí)間點(diǎn)的核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)蛋白、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表達(dá)的影響,以及使用磷脂酰肌醇-3磷酸/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的特異性拮抗劑Ly294002初步探討是否通過磷脂酰肌醇-3磷酸/蛋白激酶B信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,探討辛伐他汀對膿毒癥大鼠肺保護(hù)作用的可能機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供理論支持。
　　 [方

2、法]
　　 通過鼠尾靜脈注射內(nèi)毒素(LPS)復(fù)制膿毒癥大鼠模型。120只SD大鼠(雄性,SPF級,體重220～250克)隨機(jī)分為空白對照(Control)組(生理鹽水2ml iv.)、內(nèi)毒素(LPS)組(LPS5mg/kg,用生理鹽水稀釋至2ml iv.)、LPS+Sta組(LPS5mg/kg,Sta20mg/kg,生理鹽水稀釋至2ml iv.)、LPS+Sta+Ly組(LPS5mg/kg,Sta20mg/kg,Ly1.4mg/

3、kg,生理鹽水稀釋至2ml iv.);每組30只。分別在用藥后2h,4h,6h,12h,24h時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)快速處死6只大鼠,按標(biāo)準(zhǔn)步驟取右肺中葉組織100mg送檢,用免疫組織化學(xué)法檢測肺組織NF-kB表達(dá);取右肺下葉100mg用RT-PCR法檢測肺組織iNOSmRNA表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 1.各組大鼠肺組織H-E染色所見Control組各時(shí)點(diǎn)肺泡、肺間質(zhì)結(jié)構(gòu)正常;LPS組2h開始出現(xiàn)炎癥損傷,以6h最為顯著:肺泡腔

4、變窄,肺泡腔內(nèi)可見中性粒細(xì)胞明顯增多,偶見單核/巨噬細(xì)胞(MΦ)肺泡壁增厚,肺間質(zhì)充血水腫;LPS+Sta組中性粒細(xì)胞細(xì)胞浸潤較LPS組減輕,肺泡、肺間質(zhì)呈灶狀損害,組織間隙水腫輕;LPS+Sta+Ly組病理變化接近LPS組。
　　 2.各組大鼠肺組織不同時(shí)問點(diǎn)NF-kB蛋白表達(dá)
　　 Control組各時(shí)間點(diǎn)呈陰性表達(dá);LPS組2h起呈陽性表達(dá),至6h達(dá)高峰,12h開始下降,到24h表達(dá)仍然高于2h水平;LPS+Sta

5、組的表達(dá)及趨勢與LPS組類似,但各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)較LPS組明顯減弱,各時(shí)間點(diǎn)積分光密度(IOD)值與LPS組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);LPS+Sta+Ly組各時(shí)點(diǎn)的表達(dá)量及趨勢與LPS組比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 3.各組大鼠肺組織不同時(shí)間點(diǎn)iNOS mRNA的表達(dá)
　　 Control組各時(shí)間點(diǎn)iNOS mRNA微量表達(dá);LPS組各時(shí)間點(diǎn)iNOS mRNA較對照組明顯增高(p＜0.05),i

6、NOS的表達(dá)從2h起升高,6h達(dá)高峰,12h開始下降,到24h表達(dá)仍然高于2h水平,有明顯的時(shí)效性;LPS+Sta組各時(shí)點(diǎn)表達(dá)于2h升高,趨勢同LPS組,但各時(shí)間點(diǎn)升高幅度明顯減少,iNOS的表達(dá)接近對照組的水平(p＞0.05),各時(shí)點(diǎn)灰度比值與LPS組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05);LPS+Sta+Ly組的表達(dá)量及趨勢與LPS組類似(p＞0.05),且各時(shí)點(diǎn)表達(dá)量高于LPS+Sta組及對照組的水平(p＜0.05)。
　　

7、 4.NF-kB蛋白表達(dá)水平與iNOS mRNA表達(dá)水平的相關(guān)分析
　　 經(jīng)直線相關(guān)分析顯示,膿毒癥大鼠肺組織NF-kB蛋白表達(dá)水平與iNOS mRNA表達(dá)水平呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為r=0.72(p＜0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.膿毒癥時(shí)肺臟表現(xiàn)出以肺泡及肺間質(zhì)受累為主的損傷,肺組織NF-kB蛋白及iNOSmRNA過量表達(dá)可能是引起肺損傷的原因之一;
　　 2.辛伐他汀能改善膿毒癥時(shí)肺組織的病