辛伐他汀預(yù)處理對膿毒癥大鼠肺組織通透性的影響.pdf

1、目的：膿毒癥是微生物入侵人體后導(dǎo)致的系統(tǒng)性疾病，其特征是由病原菌引起的非特異性炎癥反應(yīng)。應(yīng)用盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)的方法制作膿毒癥大鼠模型進(jìn)而觀察辛伐他汀預(yù)處理對膿毒癥大鼠肺組織通透性影響，為膿毒癥的治療提供新的研究方向，并為膿毒癥的臨床用藥提供理論依據(jù)。
　　 方法：清潔級健康雌性wistar大鼠80只，體重200-250g（河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，合格證編號：909008）。80只大鼠隨機分為4組，Ⅰ組：正常對照組（8只）

2、；Ⅱ組：假手術(shù)組（24只）；Ⅲ組：膿毒癥CLP模型組（24只）；Ⅳ組：辛伐他汀干預(yù)后CLP造模組（24只）。除正常組外各組按時間點（6小時、24小時和48小時）處死大鼠，隨機分為3組，每組8只。本實驗采用盲腸結(jié)扎及穿孔(CLP)方法制作大鼠膿毒癥模型，給藥方法如下：辛伐他汀預(yù)處理后CLP造模組給予辛伐他汀(默沙東生產(chǎn)，批號：國藥準(zhǔn)字號H19990366)20mg/kg/d飼入（辛伐他汀溶于1ml滅菌注射用水），正常對照組、假手術(shù)組及膿毒

3、癥CLP模型組均飼入1ml滅菌注射用水，每組給藥時間均為14天。正常對照組大鼠給藥14天后即留取標(biāo)本。膿毒癥CLP模型組、假手術(shù)組及辛伐他汀干預(yù)后CLP造模組大鼠分別在制模且手術(shù)成功后6h、24h、48h留取標(biāo)本。留取大鼠左側(cè)肺組織稱取肺組織濕/干比；右側(cè)肺中葉留取標(biāo)本檢測血管內(nèi)皮生長因子-a；留取的血清標(biāo)本檢測血管內(nèi)皮生長因子-a及細(xì)胞間粘附分子-1。
　　 結(jié)果：1、大鼠一般表現(xiàn)假手術(shù)組大鼠術(shù)后約1h可轉(zhuǎn)醒，神志及活動狀態(tài)恢

4、復(fù)正常，能自由飲水及進(jìn)食，體溫也逐漸恢復(fù)正常，未再表現(xiàn)出異常。膿毒癥CLP模型組及辛伐他汀干預(yù)后CLP造模組大鼠術(shù)后約1.5h可轉(zhuǎn)醒，但精神萎靡，活動減少，僅少量進(jìn)食、飲水，身體蜷縮，對刺激反應(yīng)遲鈍，豎毛，呼吸頻率淺快或深慢，直腸溫度也升高或降低超過1℃，腹脹明顯，可有排泄稀水樣便。剖腹后有惡臭，小腸腸管脹氣，結(jié)扎端盲腸發(fā)黑，表面有黃色膿液，腹腔內(nèi)有血性滲液，肝、肺、腎等組織可見充血腫大，部分肺組織表面可見膿腫形成。辛伐他汀預(yù)處理后CL

5、P模型組表現(xiàn)較膿毒癥CLP模型組輕。2、肺組織大體肉眼觀及肺組織濕/干比值肉眼大體觀：正常對照組及假手術(shù)組大鼠肺臟組織為粉紅色，未見充血水腫；膿毒癥CLP模型組及辛伐他汀干預(yù)后CLP造模組大鼠肺臟體積增大，呈暗紅色，表面可見不同程度充血水腫，有些模型肺組織表面甚至可見膿性滲出。膿毒癥CLP模型組表現(xiàn)較辛伐他汀干預(yù)后CLP造模組重。肺組織濕/干比值：正常對照組（4.4166±0.084）與假手術(shù)組6h、24h、48h大鼠肺組織濕/干比（4

6、.2294±0.1963,4.4652±0.3542,4.6729±0.3941）比較均無明顯差異(P＞0.5)；膿毒癥CLP模型組6h、24h、48h肺組織濕/干比值（5.8581±0.136,6.0513±0.0683,7.0582±0.6625）均明顯高于假手術(shù)組及正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨時間延長，比值呈增大趨勢；辛伐他汀預(yù)處理后CLP模型組6h、24h、48h（4.3460±0.3294，3.9518±0

7、.1297，4.9786±0.1175）肺組織濕/干比值均明顯高于假手術(shù)組及正常組(P＜0.05)，但低于膿毒癥CLP模型組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。3血清VEGF-a含量正常對照組（12.68±2.08）與假手術(shù)組6h、24h、48h大鼠血清VEGF-a含量（11.81±1.83,10.52±2.17,10.91±2.07）比較均無明顯差異(P均＞0.5)；膿毒癥CLP模型組大鼠6h、24h、48h血清VEGF-a含量（1

8、7.35±2.44，25.18±2.96，35.49±6.02）均明顯高于假手術(shù)組及正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨時間延長，VEGF-a含量呈升高趨勢；辛伐他汀預(yù)處理后CLP模型組大鼠6h、24h、48h血清VEGF-a含量（11.88±1.31，13.36±4.68，12.05±2.75）均明顯高于假手術(shù)組及正常組，但低于膿毒癥CLP模型組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。4血清ICAM-1含量正常對照組（10.

9、12±1.07）與假手術(shù)組6h、24h、48h大鼠血清ICAM-1含量（11.88±1.09,11.23±1.08,11.07±1.29）比較均無明顯差異(P均＞0.5)；膿毒癥CLP模型組大鼠6h、24h、48h血清ICAM-1含量（17.68±1.66，28.78±4.32，39.04±4.54）均明顯高于假手術(shù)組及正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨時間延長，ICAM-1含量呈上升趨勢；辛伐他汀預(yù)處理后CLP模型組6h

10、、24h、48hICAM-1含量（12.32±1.96,17.14±5.29，18.15±5.46）均明顯高于假手術(shù)組及正常組，但低于膿毒癥CLP模型組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。5肺組織中VEGF-a含量正常對照組（9.67±0.82）及假手術(shù)組6h、24h、48h(10.33±0.82,10.34±0.82,9.67±1.21)大鼠肺組織中VEGF-a含量比較均無明顯差異(P均＞0.5)，肺泡無萎陷，肺泡和肺間質(zhì)無炎細(xì)胞浸

11、潤，肺泡壁無增厚，無毛細(xì)血管擴張、充血及白細(xì)胞附壁現(xiàn)象，也未見大片壞死細(xì)胞；膿毒癥CLP模型組6h、24h、48h(6.33±1.21,5.33±0.82,5.83±1.47)VEGF-a陽性細(xì)胞表達(dá)均低于假手術(shù)組及正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且隨時間延長，VEGF-a陽性細(xì)胞表達(dá)呈降低趨勢，肺泡腔變窄，肺泡壁增厚；肺充血、水腫，可見炎細(xì)胞浸潤，并可見局部肺氣腫，局部區(qū)域可見大量壞死細(xì)胞；辛伐他汀預(yù)處理后CLP模型組6h、

12、24h、48h(3.33±1.37,3.01±0.89,6.95±2.90)VEGF-a陽性細(xì)胞表達(dá)均低于假手術(shù)組及正常組，但高于膿毒癥CLP模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，與膿毒癥CLP模型組比較：肺泡萎陷破壞程度明顯減輕，肺間隔增厚程度和范圍減輕，充血、水腫不明顯，炎細(xì)胞浸潤也減輕。
　　 結(jié)論：
　　 1、應(yīng)用CLP的方法可制造出膿毒癥的模型。
　　 2、膿毒癥時大鼠肺組織充血水腫，濕/干比值明顯