甲狀腺激素對大鼠腦缺血再灌注損傷后NF-κB與TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、缺血性腦血管病是一種發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高的三高疾病，嚴(yán)重威脅著人類的健康并影響著生活質(zhì)量。近年來關(guān)于缺血性腦血管病的治療主要有動靜脈溶栓、機(jī)械取栓等，主要目的是為了及時(shí)再通血流，挽救缺血半暗帶。血管再通后雖使組織細(xì)胞重新獲得了新鮮的血流，避免了進(jìn)一步的缺血缺氧，但隨之而帶來的缺血再灌注損傷問題也是目前最突出且研究熱門的問題。缺血再灌注損傷是指當(dāng)組織重新獲得血流后，組織器官不僅沒有得到好轉(zhuǎn)，反而出現(xiàn)新的損傷。缺血再灌注損傷涉及了多

2、種復(fù)雜的病理過程，炎癥反應(yīng)是參與其中重要的病理機(jī)制之一，其最終作用結(jié)果可導(dǎo)致神經(jīng)元損傷死亡。炎性因子核轉(zhuǎn)錄因子（nuclear factor-kappa B，NF-κB）、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)在腦缺血后容易表達(dá)，以此做為觀察指標(biāo)，可以較好的模擬人體內(nèi)腦缺血的病理生理過程。我們知道，甲狀腺激素對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育具有不可忽視的影響。但目前關(guān)于甲狀腺激素對缺血再灌注損傷(Ischemic-r

3、eperfusion，IR)作用的報(bào)道相對較少。本實(shí)驗(yàn)通過制作大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebralartery occlusion，MCAO)模型，觀察了甲狀腺激素(Triiodothyronine，T3)對缺血再灌注后炎性因子NF-κB、TNF-α表達(dá)的影響，探討了甲狀腺激素在炎癥反應(yīng)通路中的作用，為腦血管病的治療提供了新思路。
　　目的:
　　探討甲狀腺激素(T3)對大鼠腦缺血再灌注損傷(IR)后缺血側(cè)皮質(zhì)

4、NF-κB、TNF-α表達(dá)的影響。
　　方法:
　　將96只健康成年SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、假手術(shù)+T3組、IR組、IR+T3組，采用改良線栓法制作大鼠大腦中動脈缺血2h再灌注模型，假手術(shù)+T3組及IR+T3組在造模后1h再灌注后6h分別腹腔注射甲狀腺激素10 ug/100 g，其余兩組分別腹腔注射等量生理鹽水。在大鼠麻醉蘇醒后24h，根據(jù)Longa5分制法對其進(jìn)行神經(jīng)功能評分，于再灌注24h后取腦組織。用2，3，5-

5、氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC)染色法檢測大鼠腦梗死灶的面積百分比，HE染色法觀察腦組織的病理結(jié)構(gòu)的改變。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-Time PCR)法檢測大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)NF-κBmRNA、TNF-αmRNA的表達(dá)水平，免疫組化染色法檢測缺血側(cè)皮質(zhì)NF-κB、TNF-α蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果:
　　1.IR+T3組大鼠的神經(jīng)功能評分及腦梗死灶面積百分

6、比較IR組的明顯降低(P＜0.05)。
　　2.HE染色結(jié)果顯示IR+T3組大鼠腦組織病理損傷較IR組明顯減輕。
　　3.Real-time PCR及免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，假手術(shù)組、假手術(shù)+T3組大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)NF-κB mRNA、TNF-αmRNA及其蛋白表達(dá)量無明顯差異。與假手術(shù)組相比，IR組大鼠缺血側(cè)皮質(zhì)NF-κB mRNA、TNF-αmRNA及其蛋白表達(dá)量顯著增多(P＜0.05);與IR組相比，IR+T3組大鼠NF-