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文檔簡介
1、目的:探討核因子—κB(NF—κB)在梗阻性黃疸肝損傷中的作用及維拉帕米對其表達的影響。 方法: (1)將雄性SD大鼠48只隨機分成膽總管結扎組(BDL組)、膽總管結扎+維拉帕米組(BDL+V組)、假手術組(Sham組),每組16只。 (2)氯胺酮腹腔注射麻醉后經(jīng)腹游離膽總管并結扎、切斷,制作梗阻性黃疸大鼠模型。Sham組僅開腹后游離膽總管,不結扎切斷膽總管。 (3)BDL+V組術后第一天起,每天腹腔注射
2、維拉帕米2 mg/kg,直至處死。Sham組和BDL組則同期腹腔注射等量生理鹽水。 (4)分別于術后第7天、14天處死大鼠。取肝組織行HE染色常規(guī)病理,TUNEL法觀察肝細胞凋亡,采用免疫組化法及蛋白質印跡法檢測肝組織NF—κB p65蛋白表達以及丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。經(jīng)下腔靜脈取血測定血清總膽紅素(TB)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、腫瘤壞死因子—α(TNF—α)和白細胞
3、介素-6(IL-6)。 結果: (1)肝臟病理形態(tài)學觀察:膽總管結扎術后第7天、14天取標本見肝臟腫大呈黃褐色,膽總管近端明顯擴張,且張力很高;假手術對照組無上述改變。光鏡下肝臟病理改變:BDL組大鼠可見小膽管增生,匯管區(qū)炎性細胞浸潤,14天標本見大量小膽管增生,部分區(qū)域肝細胞出現(xiàn)變性、壞死;相同時間點BDL+V組大鼠肝細胞變性壞死較BDL組輕;Sham組大鼠無明顯變化。 (2)肝組織NF—κ B p65表達:B
4、DL+V組NF—κ B p65的表達在7天和14天均明顯低于BDL組;Sham組大鼠肝組織僅有微弱表達。 (3)肝細胞凋亡情況:BDL組及BDL+V組均見大量細胞凋亡;但在BDL+V組凋亡細胞數(shù)低于BDL組;Sham組肝細胞僅見少量凋亡。 (4)肝組織MDA和SOD含量的變化:BDL組及BDL+V組大鼠血清MDA含量均明顯高于Sham組而SOD明顯低于Sham組;但在BDL+V組MDA含量低于BDL組;而SOD高于BDL
5、組。 (5)血清TNF—α和IL-6的變化:BDL組及BDL+V組大鼠血清TNF—α、IL-6均明顯高于Sham組;但BDL+V組大鼠血清TNF—α和IL-6均低于BDL組。 結論: (1)NF—κ B的活化上調(diào)了梗阻性黃疸時炎癥因子的表達,對NF—κ B活性的調(diào)控可能是改善梗阻性黃疸時肝臟等器官功能損害的有效治療靶點。 (2)應用鈣離子阻滯劑維拉帕米可抑制肝臟NF—κB的表達,減少肝細胞凋亡,并降低血清
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