阻塞性黃疸大鼠肝臟核因子κB對炎癥介質(zhì)表達的調(diào)控及其在肝損傷中的作用.pdf

1、阻塞性黃疸是臨床上常見的一種病理過程。無論是良性疾病(如結(jié)石、膽管囊腫等)還是惡性疾病(如胰頭癌、膽管癌等)引起的阻塞性黃疸，其術(shù)后常伴有感染、胃腸道出血、傷口愈合延遲等并發(fā)癥，甚至出現(xiàn)肝、腎功能衰竭、敗血癥等導致死亡。近年來研究表明阻塞性黃疸時機體免疫功能的改變，特別是內(nèi)毒素血癥啟動的炎癥反應(yīng)，炎癥介質(zhì)(包括細胞因子、粘附分子等)的釋放以及炎癥介質(zhì)導致的肝臟和遠隔器官產(chǎn)生炎癥損傷與阻塞性黃疸后的各種并發(fā)癥密切相關(guān)。核因子кB(Nucl

2、ear Factor kappa B，NF-кB)是一種廣泛存在于真核細胞中的轉(zhuǎn)錄因子。它通過調(diào)控諸多細胞介質(zhì)基因的表達從而在機體自然及獲得性免疫中發(fā)揮重要的作用。激活后的NF-кB通過胞核核膜上的受體進入胞核，與相關(guān)基因的кB位點發(fā)生特異性結(jié)合，促進有關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。這些被調(diào)節(jié)的靶基因常與炎癥、免疫密切相關(guān)，其中主要包括細胞因子(如，TNF-α、IL-1等)、粘附分子、主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibilit

3、y complex，MHC)、抗原遞呈相關(guān)蛋白等。本研究旨在探索阻塞性黃疸時肝臟NF-кB對炎癥介質(zhì)的調(diào)控及其在肝損傷中的作用，并在此基礎(chǔ)上考察NF-кB特異性抑制劑吡咯烷二硫氨基甲酸脂(Pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)對阻塞性黃疸時肝臟損傷的保護作用。 本實驗采用健康SD大鼠54只，由中國科學院上海實驗動物中心提供，體重250～300克。實驗動物隨機分為三組，每組18只。建立大鼠阻塞性黃疸模型

4、，對照組僅游離膽總管，不結(jié)扎或斷離膽總管。實驗組予以結(jié)扎并切斷膽總管。PDTC組予以結(jié)扎并切斷膽總管，并在術(shù)前術(shù)后予以腹腔注射PDTC。觀察上述各組在術(shù)后4天(d)、7d、14d時的肝組織NF-кB P65蛋白表達，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)mRNA、白介素-6(IL-6)mRNA、細胞間粘附分子-1(ICAM-1)mRNA表達以及血清總膽紅素(TB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平。用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，實驗數(shù)據(jù)用均

5、數(shù)±標準差(x±s)表示。計量資料用單因素方差分析處理，兩兩間比較用q檢驗，并對NF-кB與TNF-α mRNA、IL-6mRNA、ICAM-1 mRNA的表達分別進行直線相關(guān)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義，P<0.01表示差異有顯著統(tǒng)計學意義。 實驗結(jié)果顯示術(shù)后4d、7d、14d大鼠出現(xiàn)明顯的肝損傷，表現(xiàn)為TB、ALT的明顯增高，肝組織NF-кB P65蛋白表達明顯增加，TNF-α mRNA、IL-6 mRNA、ICA

6、M-1 mRNA表達也增強。PDTC組大鼠肝NF-αB P65、ICAM-1 mRNA表達較實驗組各時相點有顯著下降，血清ALT和肝組織TNF-α mRNA較實驗組在4、7d有明顯下降。阻塞性黃疸時肝臟中NF-кB被大量激活，激活的NF-кB上調(diào)了炎癥介質(zhì)(TNF-α、ICAM-1)的表達，從而造成肝損傷。NF-кB特異性抑制劑PDTC可抑制阻塞性黃疸時肝臟NF-кB的激活，并可減輕病程早期的肝臟損傷。 最后，關(guān)于進一步工作的方