加味大柴胡湯對阻塞性黃疸大鼠中膽紅素主要轉(zhuǎn)運子的表達和肝臟能量代謝改變的影響.pdf

1、目的：通過研究加味大柴胡湯對阻塞性黃疸大鼠中MRP2的表達與肝細胞能量改變的影響，證明加味大柴胡湯能通過上調(diào)MRP2表達，降低膽汁酸的代謝，改善肝細胞的能量代謝紊亂，減輕肝臟的損傷，為加味大柴胡湯在臨床上的應(yīng)用提供更充分的理論依據(jù)。 方法：制作急性阻塞性黃疸大鼠模型，分為7、14、21天3個時段，每個時段分3組，即：(1)假手術(shù)+生理鹽水組(2ml/次，2次/日，po)(SO組)；(2)膽總管結(jié)扎+生理鹽水組(2ml/次，2次/

2、日，po)(BDL+NS組)；(3)膽總管結(jié)扎+加味大柴胡湯組(2ml/次，2次/日，po)(BDL+MMDB組)。每組6只清潔級SD大鼠，在各時段取大鼠肝組織及下腔靜脈血，檢測AST、ALB、TB、TBA；用光學(xué)顯微鏡觀察肝組織的病理改變；用免疫組化檢測MRP2蛋白表達；用RT-PCR檢測MRP2mRNA的表達；用肝組織勻漿后檢測ATP、EC。 結(jié)果：1血清學(xué)TBA測定膽總管結(jié)扎7天時，BDL+MMDB組與BDL+NS組外周血

3、TBA比SO組均上升，且后者明顯。BDL+MMDB組與SO組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。膽總管結(jié)扎14、21天時，BDL+MMDB組與BDL+NS組外周血TBA持續(xù)升高，且后者增高更明顯。BDL+MMDB組與SO組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 2肝組織MR

4、P2蛋白的表達MRP2蛋白的染色陽性產(chǎn)物分布于細胞漿/膜中。各時段檢測結(jié)果：SO組肝細胞中顯著表達。膽總管結(jié)扎7、14、21天時，BDL+MMDB組與BDL+NS組MRP2蛋白表達持續(xù)顯著減弱，且后者減弱更明顯。同時段中BDL+MMDB組與SO組相比、BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 3肝組織MRP2mRNA的表達正常肝組織中MRP2mRNA的表達明顯。膽總管結(jié)扎7、14、21天時，B

5、DL+MMDB組與BDL+NS組MRP2蛋白表達持續(xù)顯著減弱，且后者減弱更明顯。同時段中BDL+MMDB組與SO組相比、BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 4肝組織ATP,EC含量測定膽總管結(jié)扎7天時，BDL+NS組肝組織ATP、EC值降低，BDL+MMDB組變化不明顯。BDL+MMDB組與SO組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)

6、意義(P＜0.01)。膽總管結(jié)扎14天時，BDL+NS組肝組織ATP、EC值持續(xù)降低，BDL+MMDB組ATP、EC值也降低。BDL+MMDB組與SO組相比，BDL+MMDB組與BDL+NS組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。膽總管結(jié)扎21天時，BDL+NS組肝組織ATP、EC值顯著降低，BDL+MMDB組ATP、EC值持續(xù)降低。BDL+MMDB組與SO組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。BDL+MMDB組與BDL+NS組

7、相比，差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論：1膽道梗阻后，外周血清中TBA的含量增加，并隨著梗阻時間的延長逐步加重。說明膽道梗阻后肝臟存在嚴(yán)重的膽汁酸代謝障礙，這也是肝臟功能損傷的重要原因。 2膽道梗阻后，肝細胞內(nèi)ATP、EC含量減少，并隨著梗阻時間的延長逐步加重。說明膽道梗阻后肝細胞內(nèi)存在嚴(yán)重的能量代謝障礙。 3膽道梗阻后，肝組織中MRP2蛋白與MRP2mRNA的表達明顯減弱，并隨著梗阻時間的延長逐步加重