超聲微泡用于舌癌頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)超聲造影的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、眾所周知，人類口腔頜面部惡性腫瘤中以舌癌的發(fā)病率居首，而鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)是其最常見的病理類型。舌鱗癌患者易發(fā)生早期頸淋巴結(jié)及晚期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（肺部多見），而區(qū)域性淋巴結(jié)的惡性轉(zhuǎn)移會(huì)嚴(yán)重影響疾病的臨床分期、診治方案以及預(yù)后評(píng)估。因此，及早明確舌癌患者頸部淋巴結(jié)的狀況對(duì)于確定治療方案、提高治療效果十分必要。彩色多普勒是目前臨床上檢查舌癌患者頸部淋巴結(jié)的常用影像學(xué)方法之一，應(yīng)用廣泛、成熟，具有操

2、作簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)、無(wú)輻射等優(yōu)點(diǎn)，但其診斷的靈敏度及特異度稍差，仍無(wú)法滿足臨床需求。超聲微泡(ultrasound microbubbles，UM)是近代超聲醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一種新興產(chǎn)物，近年來(lái)發(fā)展尤其迅速，其應(yīng)用原理在于通過(guò)改變病變組織、器官的超聲特性而增強(qiáng)超聲顯影的清晰度，從而提高疾病診斷的靈敏性和特異性，現(xiàn)已成為超聲醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱門。
　　目的：采用新鮮兔肝VX2小瘤塊直接接種于實(shí)驗(yàn)兔的舌緣，建立舌癌頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的大型動(dòng)物模型，觀察

3、其發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的規(guī)律，選擇適宜時(shí)機(jī)進(jìn)行頸部不同性質(zhì)淋巴結(jié)的多普勒超聲檢查及超聲微泡造影，完成二者的診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)，并比較超聲微泡造影前、后頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)超聲圖像回聲強(qiáng)度的差異，評(píng)估超聲微泡造影在舌癌頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)診斷中的應(yīng)用潛能與使用價(jià)值。
　　方法：
　　1.建立兔舌癌及頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的動(dòng)物模型隨機(jī)選取新西蘭大白兔30只，將大小相近的新鮮兔肝VX2小瘤塊接種于實(shí)驗(yàn)兔左側(cè)舌緣前1/3的肌層內(nèi)，嚴(yán)密縫合。將實(shí)驗(yàn)兔按瘤塊接種

4、后的處死時(shí)間隨機(jī)分為1周組、3周組及5周組（每組10只），定期觀察實(shí)驗(yàn)兔舌部腫瘤及頸部淋巴結(jié)的生長(zhǎng)情況及大體形態(tài)，切取相應(yīng)組織進(jìn)行病理學(xué)檢查，觀察其光鏡下的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，選擇適宜的時(shí)機(jī)進(jìn)行頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的超聲檢查。
　　2.頸部淋巴結(jié)的多普勒超聲檢查及超聲微泡造影隨機(jī)選取新西蘭大白兔20只，于左側(cè)舌緣接種VX2瘤塊后嚴(yán)密縫合，建模方法同上。根據(jù)上訴實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇適宜的時(shí)機(jī)進(jìn)行頸部淋巴結(jié)的多普勒超聲檢查及自制脂質(zhì)超聲微泡造影，觀察兩種檢

5、查方法下不同性質(zhì)的頸部淋巴結(jié)的超聲影像學(xué)表現(xiàn)，分析反應(yīng)性及轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)的超聲圖像特點(diǎn)，以病理學(xué)診斷結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”進(jìn)行診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)并繪制ROC曲線。用“DFY型超聲圖像定量分析診斷儀”測(cè)量造影前、后轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)內(nèi)的回聲強(qiáng)度(echo intensity，EI)，比較二者間有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.1周組中8只實(shí)驗(yàn)兔舌體可捫及質(zhì)中偏硬的包塊，表面光滑無(wú)潰爛，但未捫及頸部腫大淋巴結(jié)。3周組中9只實(shí)驗(yàn)兔可捫及舌體包塊，體

6、積較1周組增大，質(zhì)地變硬，表面出現(xiàn)潰瘍，左側(cè)頸部可捫及腫大質(zhì)軟淋巴結(jié)，活動(dòng)度好。5周組中9只實(shí)驗(yàn)兔可捫及舌體質(zhì)硬包塊，體積大，潰爛明顯，部分可見舌體缺損，雙側(cè)頸部可捫及腫大淋巴結(jié)，部分淋巴結(jié)質(zhì)硬，形態(tài)不均勻，活動(dòng)度減小。從病理學(xué)檢查結(jié)果可知:1周組實(shí)驗(yàn)兔中，成瘤者（即舌體有腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)者）共8只，光鏡下形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為PDSCC。3周組實(shí)驗(yàn)兔中成瘤者9只，左側(cè)頸部解剖出6枚腫大淋巴結(jié)，均為反應(yīng)性淋巴結(jié)。5周組實(shí)驗(yàn)兔中成瘤者9只，其中7只頸淋

7、巴結(jié)內(nèi)見腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)（轉(zhuǎn)移率70％），共有25枚頸部腫大淋巴結(jié)，13枚為轉(zhuǎn)移灶（均位于頸深區(qū)），12枚為反應(yīng)性淋巴結(jié)。
　　2.VX2瘤塊接種5周后，共有19只實(shí)驗(yàn)兔成瘤，雙側(cè)頸深區(qū)共有53枚腫大淋巴結(jié)，病理學(xué)診斷24枚為反應(yīng)性淋巴結(jié)，29枚為轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)。多普勒超聲檢查診斷26枚形態(tài)均勻、皮髓質(zhì)分界清楚者為反應(yīng)性淋巴結(jié)（5枚誤診），27枚形態(tài)不均、結(jié)構(gòu)改變者為疑轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)（3枚誤診），診斷的靈敏度為83％(24/29)，特異度為

8、88％(21/24)，ROC曲線下面積為0.851(P＜0.01)。超聲微泡造影診斷26枚為反應(yīng)性淋巴結(jié)（2枚誤診），表現(xiàn)為造影劑多聚集于淋巴結(jié)周圍血管內(nèi)，淋巴結(jié)內(nèi)部無(wú)或僅有少量微泡聚集;27枚為疑轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，表現(xiàn)為造影劑不均勻地聚集于淋巴結(jié)內(nèi)部，診斷的靈敏度為93％(27/29)，特異度為100％(24/24)，ROC曲線下面積為0.966(P＜0.01)。造影前、后轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的EI值分別為38.7±4.18和69.2±4.01，二者

9、間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.VX2瘤塊接種1周后舌體內(nèi)已有腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，5周后實(shí)驗(yàn)兔生存狀態(tài)尚可，且具有較高的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率（轉(zhuǎn)移首先發(fā)生于頸深區(qū)淋巴結(jié)）。實(shí)驗(yàn)表明，兔VX2舌鱗癌在生物學(xué)行為（如浸潤(rùn)式生長(zhǎng)、惡性程度高）及轉(zhuǎn)移特點(diǎn)（如易出現(xiàn)早期轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)移部位）等多方面與人舌鱗癌高度相似。因此，新鮮兔肝VX2小瘤塊接種可成功建立舌癌頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的大型動(dòng)物模型，用以模擬人舌癌頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移并進(jìn)行