CUL4B在非小細胞肺癌(NSCLC)中的作用研究.pdf

1、肺癌是機體在各種致瘤因素作用下，支氣管上皮細胞異常增生形成的新生物，目前已成為致死率最高的一類惡性腫瘤。在肺癌的眾多組織類型中，非小細胞肺癌(NSCLC)發(fā)病率最高。對于ⅠA期NSCLC患者，其五年生存率可高達80％，但由于早期癥狀不明顯，大多數(shù)患者就診時已并發(fā)轉(zhuǎn)移，其五年生存率下降到25％（Ⅲ期）甚至1％（Ⅳ期），嚴重影響患者生存質(zhì)量。已經(jīng)證實多個原癌和抑癌基因的表達變化與肺癌的發(fā)生密切相關，但對NSCLC發(fā)生的具體分子機制仍有許多空

2、白。因此，進一步探索NSCLC發(fā)病機制，實現(xiàn)早期診斷、早期治療、提高患者生存率成為當務之急。
　　泛素化修飾是機體實現(xiàn)對細胞周期、信號轉(zhuǎn)導、損傷修復等生理活動調(diào)控的關鍵機制之一。CUL4B屬于Cullin基因家族，該家族成員是泛素E3連接酶CULLIN-RING(CRL)的重要組成部分。CRLs是目前已知的最大一類泛素連接酶。多項研究表明，Cullin基因家族成員與腫瘤的發(fā)生密切相關。例如伴有CUL1過表達的胃癌患者普遍預后不良，

3、CUL3功能改變與肺癌、前列腺癌的發(fā)生相關，由COP9信號小體與cullin形成的CSN-CRL的功能缺陷與泌尿系腫瘤的發(fā)生相關。此外，CUL4A異常累積與乳腺癌、肺癌、肝癌及卵巢癌的發(fā)生有關。隨著對CUL4-RINGligase的研究的不斷深入，其泛素化底物不斷被發(fā)現(xiàn)，這其中就包括與腫瘤發(fā)生相關的TSC2、RhoGTPase激活蛋白、c-Jun等。本實驗室之前對CUL4B功能的研究已證實，CUL4B既可以通過microRNAs途徑在轉(zhuǎn)

4、錄后水平調(diào)控細胞周期蛋白CDK2的表達，又可以招募PRC2在表觀遺傳學水平調(diào)控腫瘤相關基因表達。而CDK2與PRC2在包括NSCLC在內(nèi)的多種腫瘤中均表達上調(diào)，因此，我們推測CUL4B可能在NSCLC的發(fā)生過程中也發(fā)揮重要作用。目前已有研究表明CUL4B在食管癌、結腸癌、小鼠盲腸癌中分別以原癌基因和抑癌基因的身份發(fā)揮作用，但CUL4B在NSCLC發(fā)生過程中的具體作用及其機制未見報道。
　　為了探究CUL4B與NSCLC發(fā)生的關系，

5、本課題通過免疫組織化學染色證實CUL4B在NSCLC癌組織中的表達水平明顯上調(diào)。然后通過MTT、克隆形成實驗，發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定干擾肺癌細胞株H1299中CUL4B的表達后，細胞增殖速度減慢。裸鼠成瘤實驗也證實，與對照細胞相比，H1299-shCUL4B細胞成瘤率降低，腫瘤生長速度減慢、體積縮小、重量減輕。此外藥物處理實驗發(fā)現(xiàn)CUL4B低表達后細胞對化療藥物ADR、ETO更加敏感。
　　總而言之，我們通過研究發(fā)現(xiàn)，CUL4B在非小細胞肺癌發(fā)