2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  本研究通過(guò)檢測(cè)胃癌組織中CUL4B的表達(dá)情況來(lái)探討胃癌組織中CUL4B的表達(dá)水平與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系;本研究采用siRNA干擾技術(shù)干擾CUL4B的表達(dá)后,觀察并分析胃癌細(xì)胞中CUL4B的表達(dá)變化對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
  方法:
  1.采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)82例胃癌標(biāo)本的CUL4B表達(dá)情況,標(biāo)本均為經(jīng)病理確診后經(jīng)手術(shù)切除的胃癌組織。免疫組織化學(xué)染色方法結(jié)果采用SPSS16.0軟件進(jìn)行

2、統(tǒng)計(jì),并分析CUL4B的表達(dá)水平與胃癌侵襲性表型的相關(guān)性;
  2.采用Westernblot檢測(cè)胃癌組織及正常組織中CUL4B的表達(dá)情況;
  3.采用Westernblot檢測(cè)6株胃癌細(xì)胞系和1株正常胃粘膜細(xì)胞中CUL4B的表達(dá)水平;
  4.采用siRNA干擾MGC803細(xì)胞系中CUL4B的表達(dá),實(shí)驗(yàn)分組分別為:陰性對(duì)照組(轉(zhuǎn)染FAM-NC)及干擾組(siRNA-958,siRNA-2247)。轉(zhuǎn)染完成后,采用W

3、esternblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后CUL4B蛋白表達(dá)水平的變化及采用qRT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后CUL4BmRNA表達(dá)水平的變化。
  5.采用Transwell法檢測(cè)MGC803細(xì)胞在siRNA干擾前后侵襲、遷移能力的變化。
  6.采用平板克隆法檢測(cè)胃癌MGC803細(xì)胞在siRNA干擾前后增殖能化。
  7.采用Westernblot檢測(cè)Wnt/β-catenin信號(hào)通路蛋白上β-catenin及Cyclin-D1表

4、達(dá)水平的變化;
  結(jié)果:
  1.CUL4B在胃癌組織中表達(dá)上調(diào):采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)胃癌切除標(biāo)本中胃癌組織CUL4B的表達(dá)情況,結(jié)果顯示CUL4B在78.04%(64/82)病例的腫瘤組織中表達(dá)上調(diào)。與臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果顯示CUL4B的高表達(dá)與胃癌侵襲性表型(高TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯)相關(guān)(p<0.05);
  2.CUL4B在胃癌細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào):采用Westernbloting檢測(cè)的

5、6株胃癌細(xì)胞系(分別為AGS、BGC823、MGC803、HGC27、SGC7901、MKN45)和1株正常胃粘膜細(xì)胞GES-1中CUL4B的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)CUL4B的表達(dá)水平較正常細(xì)胞而言,在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)升高,并且,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);
  3.Westernblot結(jié)果顯示CUL4B在胃癌組織中的表達(dá)水平較正常組織的表達(dá)水平明顯上調(diào),且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05);
  4.Westernblo

6、t及qRT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后CUL4B蛋白和CUL4BmRNA的表達(dá)水平較陰性對(duì)照組明顯下調(diào)(p<0.05);
  5.Transwell法侵襲遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞侵襲及遷移能力較陰性對(duì)照組明顯下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
  6.細(xì)胞平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞克隆形成能力較陰性對(duì)照組明顯減弱,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
  7.siRNA轉(zhuǎn)染胃癌MGC803細(xì)胞后,Wnt/β-

7、catenin信號(hào)通路上β-catenin及Cyclin-D1蛋白表達(dá)水平均顯著下降(p<0.05)。
  結(jié)論:
  1.CUL4B主要表達(dá)于細(xì)胞核,且其在胃癌組織中表達(dá)上調(diào)。CUL4B的高表達(dá)與胃癌侵襲性表型相關(guān)。
  2.CUL4B在胃癌組織中的表達(dá)水平較正常胃組織升高,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  3.CUL4B在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)水平普遍升高。
  4.siRNA干擾胃癌細(xì)胞CUL4B的表達(dá)后,明顯

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