鋅指小腦蛋白5促進非小細胞肺癌惡性進展的機制探究.pdf

1、本文主要從以下幾方面進行論述：
　　第一部分 鋅指小腦蛋白5在非小細胞肺癌中的表達及其與臨床病理分期相關(guān)性的分析.
　　目的：
　　肺癌是是世界上發(fā)病率最高的惡性腫瘤，也是腫瘤中導致病人死亡的首要原因。鋅指小腦蛋白家族成員蛋白(Zic family member)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本研究旨在探索鋅指小腦蛋白5(ZIC5)在NSCLC中的表達，并分析其與臨床病理分期間的關(guān)系。
　　方法：
　　應用

2、腫瘤基因組圖譜(the cancer genome atlas，TCGA)公共數(shù)據(jù)庫篩選出在NSCLC中特異性高表達的ZIC5，并選取南京軍區(qū)總醫(yī)院心胸外科50例肺癌和癌旁正常組織，使用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)方法檢測ZIC5的信使RNA(mRNA)的表達情況并分析其表達與臨床病理表現(xiàn)的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　TCGA數(shù)據(jù)庫分析顯示：ZIC5在肺腺癌和肺鱗癌組織中的表達均高于其癌旁正常組織。在50例

3、NSCLC組織中，45例(90％)腫瘤組織中的ZIC5mRNA表達高于瘤旁正常組織(p＜0.01)，且ZIC5的高表達與更大的腫瘤體積(p=0.032)，性別(p=0.048)以及腫瘤類型(p=0.0017)相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　ZIC5在非小細胞型肺癌組織中高表達，且ZIC5可能參與了非小細胞型肺癌的惡性進展。
　　第二部分 鋅指小腦蛋白5促進非小細胞型肺癌惡性表型的機制研究.
　　目的：
　　鋅指小腦

4、蛋白家5(Zic family member5，ZIC5)可能是一個潛在的促進非小細胞肺癌惡性表型的促癌基因。本研究旨在探討ZIC5蛋白在非小細胞肺癌中的表達，并分析其與NSCLC惡性表型的關(guān)系及其潛在的調(diào)控機制，為肺癌的臨床治療提供新的靶點。
　　方法：
　　1.使用qRT-PCR方法和western blot法檢測NSCLC細胞系中ZIC5的mRNA和蛋白的表達情況。
　　2.設計合適的siRNA干擾ZIC5的表達

5、，體外功能實驗觀察ZIC5對腫瘤增殖、遷移能力及細胞周期、凋亡的影響。
　　3.體內(nèi)裸鼠移植瘤模型實驗觀察ZIC5的干擾對NSCLC腫瘤在裸鼠體內(nèi)的生長的影響。
　　4.使用qRT-PCR方法和western blot法檢測沉默ZIC5后相關(guān)細胞周期蛋白的的mRNA和蛋白的表達情況變化。
　　結(jié)果：
　　1.ZIC5在肺癌細胞系的表達明顯高于肺上皮正常細胞。沉默ZIC5后H1703和H1299細胞株的增殖、遷移和

6、侵襲能力明顯降低，并使細胞周期阻滯在G2/M期。
　　2.體內(nèi)成瘤實驗顯示，沉默ZIC5后腫瘤的生長速度及體積均小于對照組。對移植瘤進行免疫組化染色顯示，沉默ZIC5的實驗組的KI67和CCNB1表達均低于對照組(p＜0.05)。
　　3.qRT-PCR和western blot結(jié)果顯示，沉默ZIC5后，CCNB1和phospho-CDK1的表達也受到了明顯的抑制，而其它的細胞周期蛋白沒有受到影響。
　　結(jié)論：