哮喘小鼠白細(xì)胞介素-13和周期蛋白D1的表達(dá)及布地奈德、尼卡地平的干預(yù)作用.pdf

1、目的:研究哮喘小鼠氣道及肺組織中白細(xì)胞介素-13（IL-13）和周期蛋白D1(Cyclin D1)的表達(dá)情況和對氣道平滑肌增生肥厚的影響，探討布地奈德和尼卡地平對哮喘模型的干預(yù)作用;
　　方法:運(yùn)用卵清蛋白(OVA)致敏和激發(fā)的方法，建立哮喘小鼠模型。選擇清潔級BALB/c雌性小鼠為實(shí)驗(yàn)動物。60只小鼠隨機(jī)分成空白組、模型組、布地組、尼卡組。觀察各組小鼠氣道及肺組織HE染色、Masson染色情況，用圖形分析軟件(Image-Pro

2、 Plus，IPP)分析各組小鼠氣道平滑肌層厚度(WAm/Pi)變化情況;免疫組化法檢測各組小鼠氣道以及肺組織中IL-13和Cyclin D1的表達(dá);RT-PCR法檢測各組小鼠氣道以及肺組織中IL-13 mRNA和Cyclin D1 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:1.肺組織病理改變:HE染色顯示模型組上皮壞死脫落，氣道平滑肌明顯增生肥厚，上皮下纖維化，大量炎性細(xì)胞浸潤。Masson染色顯示模型組氣道及血管周圍大量膠原沉積，布地組和尼

3、卡組上述表現(xiàn)明顯輕于模型組;
　　2圖像分析顯示:與空白組(2.56±1.34)相比，模型組(9.12±2.46)、布地組(3.98±1.62)和尼卡組(6.32±1.59)氣管平滑肌厚度（WAm/pi）明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);和模型組相比，布地組和尼卡組小鼠WAm/Pi較模型組顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);且布地組WAm/Pi顯著低于尼卡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);
　　3.免疫

4、組化檢測IL-13的表達(dá):與空白組(2.66±1.67)％相比，模型組(8.64±1.83)％、尼卡組(5.06±1.66)％小鼠氣道及肺組織IL-13表達(dá)增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，布地組(3.61±1.77)％與空白組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05);與模型組相比，布地組和尼卡組IL-13的表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);布地組IL-13的表達(dá)低于尼卡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;
　　4.免疫

5、組化檢測Cyclin D1的表達(dá):與空白組(7.24±2.23)％相比，模型組(21.80±4.95)％、布地組(10.60±3.88)％和尼卡組(14.64±5.48)％小鼠氣道及肺組織Cyclin D1表達(dá)增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組相比，布地組和尼卡組Cyclin D1的表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;布地組和尼卡組相比，布地組Cyclin D1的表達(dá)低于尼卡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);<

6、br>　　5.PT-PCR檢測IL-13 mRNA的表達(dá):與空白組(0.09±0.02)相比，模型組(0.61±0.03)、布地組(0.17±0.02)和尼卡組(0.30±0.03)小鼠肺組織中IL-13mRNA的水平增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組相比，布地組和尼卡組肺組織中IL-13mRNA的水平下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;布地組和尼卡組相比，布地組低于尼卡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;
　

7、　6.PT-PCR檢測Cyclin D1 mRNA的表達(dá):與空白組(0.30±0.01)相比，模型組(1.30±0.01)、布地組(0.77±0.33)和尼卡組(0.89±0.01)小鼠肺組織中Cyclin D1 mRNA的水平增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組相比，布地組和尼卡組肺組織中Cyclin D1mRNA的水平下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);布地組和尼卡組相比，布地組低于尼卡組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.

8、05）;
　　7.模型組Cyclin D1和IL-13蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.702，P＜0.05);氣道平滑肌厚度與Cyclin D1蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.915，P＜0.05);氣道平滑肌厚度與IL-13蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(γ=0.539.P＜0.05);
　　結(jié)論:1.IL-13和Cyclin D1的蛋白及mRNA在哮喘小鼠氣道及肺組織內(nèi)表達(dá)增高，兩蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)，且與哮喘氣道平滑肌增生程度呈正相關(guān)。<