瘦素及其受體在哮喘BALB-c小鼠肺組織中的表達(dá)及布地奈德的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　建立OVA致敏和激發(fā)的哮喘小鼠模型;觀察不同嚴(yán)重程度哮喘小鼠與正常小鼠肺組織中瘦素及其受體的表達(dá)變化;觀察哮喘小鼠在布地奈德干預(yù)后肺組織中瘦素及其受體表達(dá)的變化。
　　方法：
　　4～6周齡，18～20g健康清潔級(jí)雄性Balb/c小鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、誘喘3天組、誘喘7天組、布地奈德干預(yù)組。10μg卵白蛋白(ovalbumin，OVA)+1mgAI(OH)3+0.4mlNS混懸液腹腔注射對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)

2、行致敏（第0、7、14天），1％OVA霧化激發(fā)（第21～23天）建立誘喘3天哮喘模型組，1％OVA霧化激發(fā)（第21～27天）建立誘喘7天哮喘模型組，并于激發(fā)階段對(duì)誘喘7天組小鼠進(jìn)行干預(yù)（霧化吸入布地奈德混懸液）;正常對(duì)照組不給予任何處理;末次激發(fā)后24小時(shí)內(nèi)取材，肺組織石蠟包埋切片后行HE染色觀察病理變化;免疫組化和Westernblot方法測(cè)定各組肺組織瘦素及瘦素受體蛋白的表達(dá)情況;Realtime-PCR方法檢測(cè)肺組織中的瘦素及瘦素

3、受體mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、肺組織病理改變:誘喘7天組較3天組小鼠氣道炎癥反應(yīng)明顯，支氣管壁周圍有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，布地奈德干預(yù)組氣道炎癥明顯減輕，正常對(duì)照組無(wú)上述病理改變。
　　2、免疫組化方法檢測(cè)肺組織瘦素蛋白的表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)明顯增高（0.2433±0.0309vs0.1828±0.0134，P＜0.05）;誘喘7天組較3天組表達(dá)明顯增高（0.3445±0.0395vs0.243

4、3±0.0309，P＜0.05）;布地奈德干預(yù)組較誘喘7天組表達(dá)略降低（0.3308±0.0388vs0.3445±0.0395，P＞0.05）。瘦素受體蛋白的表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)明顯降低(0.1847±0.0390vs0.2562±0.062，P＜0.05);誘喘7天組較誘喘3天組表達(dá)略降低（0.1689±0.038vs0.1847±0.0390，P＞0.05）;布地奈德干預(yù)組較誘喘7天組表達(dá)明顯增高(0.3143±0.0

5、564vs0.1689±0.038,P＜0.05)。
　　3、Westernblotting方法檢測(cè)肺組織瘦素蛋白表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)明顯增高（0.516±0.044vs0.271±0.048，P＜0.05）;誘喘7天組較3天組表達(dá)明顯增高（0.714±0.079vs0.516±0.044，P＜0.05）;布地奈德干預(yù)組較誘喘7天組表達(dá)略降低（0.706±0.051vs0.714±0.079，P＞0.05）。瘦素受體蛋

6、白表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)明顯降低（0.459±0.089vs0.564±0.072，P＜0.05）;誘喘7天組較3天組表達(dá)略降低（0.438±0.094vs0.459±0.089，P＞0.05）;布地奈德干預(yù)組較誘喘7天組表達(dá)明顯增高（0.623±0.101vs0.438±0.094，P＜0.05）。
　　4、肺組織瘦素mRNA的表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)明顯增高（1.346±0.261vs1.00±0.00，P＜

7、0.05）;誘喘7天組較3天組表達(dá)明顯增高（1.984±0.398vs1.346±0.261，P＜0.05）;布地奈德干預(yù)組較誘喘7天組表達(dá)略降低（1.852±0.425vs1.984±0.398，P＞0.05）。瘦素受體mRNA的表達(dá):誘喘3天組較正常對(duì)照組表達(dá)略降低（0.906±0.384vs1.00±0.00，P＞0.05）;誘喘7天組較3天組表達(dá)略降低（0.845±0.353vs0.906±0.384，P＞0.05）;布地奈德干