尾加壓素Ⅱ受體拮抗劑Urantide減輕大鼠血管鈣化.pdf

1、背景及目的：血管鈣化（vascular calcification）作為心血管事件的危險因素之一，與高血壓、動脈粥樣硬化、糖尿病、慢性腎病等疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關系。血管鈣化的過程受到多種因素的影響，多種活性因子、尤其是血管旁分泌/自分泌因子在血管鈣化的調控過程中發(fā)揮著重要的作用。我們課題組前期研究發(fā)現，尾加壓素II（Urotensin II，UII）作為一種縮血管活性肽，參與了血管鈣化的發(fā)生和發(fā)展。然而，采用其特異性阻斷劑能否干預

2、血管鈣化的發(fā)生發(fā)展，尚不清楚。為此，本課題在血管鈣化的大鼠模型上，研究了UII受體特異性拮抗劑Urantide對大鼠血管鈣化的作用。
　　方法：7周齡雄性SD大鼠30只，隨機分為3組，分別為正常對照組、鈣化組[動脈鈣化模型制作：僅在第一天8:00予以維生素D3（300，000U/kg）肌肉注射，尼古丁25mg/kg溶于花生油中灌胃，8:00與18:00各灌胃1次，之后常規(guī)飼養(yǎng)]、鈣化+urantide組[造模同鈣化組，同時第二天予

3、皮下植入Alzet微量滲透泵（Alzet Osmotic Pumps2006），以30ug/kg/d速度持續(xù)給予urantide]，6周后進行試驗，分別測定大鼠血管組織鈣含量、堿性磷酸酶（Alkaline phosphatases，ALP）活性及血管Von Kossa染色；采用免疫組織化學法檢測大鼠主動脈UII及其受體GPR14（Urotensin II receptor，UT）蛋白表達；采用蛋白免疫印跡實驗法（Western blot

4、）測定大鼠主動脈UT表達。
　　結果：Von Kossa染色可見鈣化組大鼠主動脈出現典型的鈣化結節(jié)，大量黑色顆粒及塊狀物沉淀，以中膜最為明顯，鈣化+urantide組主動脈鈣沉淀顯著減輕。鈣化組大鼠血管組織鈣含量顯著高于正常對照組（p<0.001），鈣化+urantide組血管組織鈣含量顯著低于鈣化組（p<0.01）。鈣化組大鼠血管組織堿性磷酸酶活性顯著高于正常對照組（p<0.05），鈣化+urantide組血管組織堿性磷酸酶活性

5、顯著低于鈣化組（p<0.05）。免疫組織化學染色顯示，鈣化組主動脈UII表達高于正常對照組，鈣化+urantide組主動脈UII表達低于鈣化組；鈣化組主動脈GPR14(UT)表達高于正常對照組，鈣化+urantide組主動脈GPR14(UT)表達低于鈣化組。蛋白免疫印跡實驗法顯示，鈣化組主動脈GPR14(UT)表達高于正常對照組（p<0.05），鈣化+urantide組主動脈GPR14(UT)表達低于正常對照組（p<0.05）。