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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察大鼠血管鈣化模型心血管組織中尾加壓素 II(urotensin II, UII)及其受體(urotensin II receptor, UT,或稱(chēng)GPR14)表達(dá)的變化,探討UII及其受體在血管鈣化中的意義。
方法:9周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分成4組,每組10只,分別為正常對(duì)照組、鈣化組(于第一天維生素D3肌注,300,000U/kg,同時(shí)尼古丁,25mg/kg,灌胃2次,之后常規(guī)飼養(yǎng))、鈣化+L-精氨酸(1g/kg,灌
2、胃4周,每天1次)組及鈣化+蛋氨酸(1g/kg,灌胃4周,每天1次)組,4周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn),分別測(cè)定大鼠血管鈣含量、堿性磷酸酶(ALP)活性及Von Konsa染色以判斷血管鈣化程度;采用放射免疫法檢測(cè)大鼠血漿、主動(dòng)脈和心肌的UII蛋白含量;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)心血管組織UII蛋白表達(dá);RT-PCR法檢測(cè)心血管組織UT mRNA水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用Prism4統(tǒng)計(jì)軟件分析。
結(jié)果:Von Kossa染色可見(jiàn)鈣化血管(主動(dòng)脈)中膜大量黑
3、色顆粒及塊狀物沉淀,以鈣化組及及鈣化+蛋氨酸最為明顯。與正常對(duì)照組比較,大鼠鈣化血管鈣含量在鈣化組、鈣化+L-精氨酸組及鈣化+蛋氨酸組分別增加2.2倍(P<0.01)、1.8倍(P<0.05)和6.9倍(P<0.01); ALP活性在鈣化組中增加1.7倍(P<0.05),但鈣化+L-精氨酸組及鈣化+蛋氨酸組與正常組比較卻無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;血管UII含量在鈣化組、鈣化+L-精氨酸與鈣化+蛋氨酸組分別增加3.0倍、2.6倍及2.9倍(P<0.0
4、5),免疫組化結(jié)果顯示鈣化組、鈣化+L-精氨酸組及鈣化+蛋氨酸組UII表達(dá)高于對(duì)照組,結(jié)果與放射性免疫結(jié)果相一致,但各組血漿UII含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;鈣化組織UT mRNA表達(dá)上調(diào),在血管中,鈣化組、鈣化+L-精氨酸與鈣化+蛋氨酸組分別增加1.8倍(P<0.05)、1.5倍(P>0.05)及2.7倍(P<0.01),而心肌mRNA分別增加1.9倍(P<0.05),1.3倍(P>0.05)及2.2倍(P<0.05)。
結(jié)論:大鼠心
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