尾加壓素Ⅱ及其受體在GK鼠大動脈中表達量的增高及其意義.pdf

1、目的：
　　 探討尾加壓素Ⅱ(UrotensinⅡ)及其受體(GPR14)在糖尿病血管并發(fā)癥形成及發(fā)展中的作用及其意義，探尋糖尿病血管并發(fā)癥預(yù)防及治療的新途徑。
　　 方法：
　　 試驗分為自發(fā)性糖尿病模型GK大鼠組與正常Wistar大鼠組，大鼠均選擇雄性，3-5個月月齡，體重300-350g，于山東省口腔醫(yī)院實驗室層流架內(nèi)標準化飼養(yǎng)，隨機檢測大鼠血糖濃度，要求隨機檢測中GK大鼠血糖高于11.1 mol/L，wi

2、star大鼠血糖低于11.1mol/L，合格老鼠被麻醉致死并于無菌條件下立即取出升主動脈直至胸主動脈。動脈取下后隨機切下適量組織送病理科做冰凍切片后進行HE染色及油紅0染色。剩余組織編號并平均分為兩組。一組固定于4％多聚甲醛，一組保存于-80℃保存。固定于4％多聚甲醛組進行免疫組化檢測，保存于-80℃組行RT-PCR檢測。通過HE染色及油紅O染色篩選出符合實驗要求主動脈組織，通過免疫組化了解尾加壓素Ⅱ及其受體表達部位及與對照組相比表達量

3、的高低。通過RT-PCR檢測尾加壓素Ⅱ及其受體mRNA表達量的多少及其意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過對大鼠血糖隨機檢測選取正常的GK大鼠與Wistar大鼠，即：GK大鼠隨機血糖監(jiān)測達11. lmol/L以上，Wistar大鼠隨機血糖監(jiān)測正常。
　　 2.通過HE染色及油紅0染色我們選取主動脈組織符合以下條件：①血管的內(nèi)膜，中膜，外膜有著清晰的輪廓。②血管內(nèi)皮表面覆蓋有單層上皮細胞。③單層上皮細胞是完整的并且

4、連續(xù)的。④平滑肌細胞與彈力纖維界限清晰排列規(guī)整。⑤鏡下沒有脂質(zhì)條紋，沒有纖維斑塊，沒有動脈粥樣硬化斑塊。
　　 3.免疫組化試驗中我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ及其受體在GK鼠中表達量明顯高于Wistar大鼠，特別是尾加壓素Ⅱ，GK鼠動脈組織中血管內(nèi)膜及外膜中的表達量明顯增高。相對于wistar大鼠，尾加壓素Ⅱ受體在GK鼠動脈組織內(nèi)膜中的表達量顯著增高，而在外膜，二者沒有明顯區(qū)別。同時我們從免疫組化中可以看出，血管外膜中尾加壓素Ⅱ及其受體表

5、達的非常廣泛及彌散。
　　 4.RT-PCR結(jié)果與免疫組化基本一致，血管外膜中我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ受體表達量沒有明顯區(qū)別(P＞0.05)，而尾加壓素Ⅱ表達量在GK鼠中明顯高于wistar大鼠(P＜0.01)。在去掉血管外膜的組織中無論是尾加壓素Ⅱ還是其受體，GK鼠中明顯高于wistar大鼠(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 通過試驗分析我們發(fā)現(xiàn)尾加壓素Ⅱ及其受體在糖尿病血管并發(fā)癥發(fā)生之前已經(jīng)高表達于動脈組織，結(jié)