沙地云杉體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中多胺作用機(jī)理的研究.pdf

1、論文以沙地云杉成熟合子胚為材料，研究了沙地云杉體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中的生理生化變化，著重探討了多胺在體胚發(fā)生中的作用機(jī)理。 1.首先對(duì)沙地云杉體細(xì)胞胚發(fā)生系統(tǒng)的優(yōu)化培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究表明：誘導(dǎo)初始愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：SH +2，4-D(0.1 mg/L)+6-BA(0.1mg/L)；分化胚性愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為；LS+ABA(5.0mg/L)+PEG4000(50.0g/L)加入50.0g/LPEG4000可改善胚性愈傷組織

2、的質(zhì)量，誘導(dǎo)出的胚性愈傷組織黃綠色、色澤亮麗、松散、顆粒狀、大小均勻一致。胚性愈傷組織誘導(dǎo)周期為60d，第50d左右需繼代擴(kuò)繁。 2.沙地云杉胚性愈傷組織體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中，SOD酶活性較高，而POD活性較低。附加外源Put促進(jìn)體細(xì)胞胚發(fā)生過程中POD酶活性上升，SOD酶活性降低。附加多胺抑制劑時(shí)魚雷胚時(shí)期的SOD酶活性較高，隨著胚的成熟SOD酶活性逐漸下降，而POD酶活性一直保持上升狀態(tài)。 3.體細(xì)胞胚胎發(fā)生初期(多

3、細(xì)胞原胚時(shí)期)及成熟階段(球形胚、心形胚、魚雷胚及子葉胚時(shí)期)內(nèi)源PA含量不同；附加30mg/L的外源Put可以提高內(nèi)源PA的含量，促進(jìn)球形胚的發(fā)生。特別是對(duì)內(nèi)源Put和Spin的影響較大。附加外源Put后球形胚時(shí)期內(nèi)源PA含量明顯增加，但體細(xì)胞胚成熟階段內(nèi)源PA含量下降。維持較高水平的Put/Spd和Put/Spm是細(xì)胞柄團(tuán)前期發(fā)育所需要的，但不利于體細(xì)胞胚成熟。 4.CHA和MGBG 2種抑制劑處理的結(jié)果基本相似。單獨(dú)附加加