水曲柳體細(xì)胞胚胎發(fā)生的同步化調(diào)控.pdf

1、充分利用植物體細(xì)胞胚的前提是要有一個(gè)高頻同步的體細(xì)胞胚發(fā)生體系，這也是自動(dòng)控制其進(jìn)程和研究其生理生化特性和分子生物學(xué)等問題所必須的。本研究利用未成熟的水曲柳合子胚為外植體誘導(dǎo)體細(xì)胞胚發(fā)生，探討了滲透壓、冷凍和ABA等處理對(duì)子葉形體細(xì)胞胚同步化發(fā)生的影響，及干燥和冷凍處理對(duì)體細(xì)胞胚萌發(fā)、體胚苗生根及后期生長(zhǎng)的影響。通過研究得出如下主要結(jié)論： 手工選擇法、過篩法、饑餓法和后期液體培養(yǎng)法均不適合于水曲柳體細(xì)胞胚同步化的調(diào)控。

2、滲透壓調(diào)節(jié)法、冷凍法和ABA調(diào)節(jié)法均可提高水曲柳子葉形胚的同步化率。其中利用蔗糖來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓的方法所得到的子葉胚同步化率最高，然而在體細(xì)胞胚發(fā)育過程中存在明顯的敗育現(xiàn)象，其中以前期誘導(dǎo)培養(yǎng)15 d，蔗糖濃度降為50 g·L<'-1>時(shí)水曲柳體細(xì)胞胚的同步化率最高為81.0％。 ABA調(diào)節(jié)法中體細(xì)胞胚同步化率略低于滲透壓調(diào)節(jié)法，且無明顯的敗育現(xiàn)象，但畸形胚發(fā)生率明顯升高，在此方法中以前期誘導(dǎo)30 d，ABA濃度為1 mg/

3、L的處理最適合于水曲柳體細(xì)胞胚的同步化調(diào)控。 冷凍處理后子葉胚的質(zhì)量好，且大小均一，但其同步化率明顯低于其他兩種處理，其中前期誘導(dǎo)15 d、在低溫條件下冷凍7 d的處理最有利于水曲柳體細(xì)胞胚的同步化。 從研究結(jié)果中可以看出，僅靠單一因素來調(diào)節(jié)體細(xì)胞胚的發(fā)育，很難獲得高質(zhì)量、同步化的水曲柳體細(xì)胞胚，因此幾種方法結(jié)合使用將更有利于水曲柳體細(xì)胞胚的同步化調(diào)控。 同時(shí)，研究中還發(fā)現(xiàn)，前期誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)不利于水曲柳體細(xì)胞