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文檔簡介
1、目的: 外泌體是由多種細(xì)胞分泌的一種生物小囊泡。研究表明只有在足夠量的樹突狀細(xì)胞來源的外泌體(DEX)治療下,負(fù)載有腫瘤抗原的DEX才能產(chǎn)生強大的特異性抗腫瘤效應(yīng)。本實驗通過黃芪多糖(APS)在促進(jìn)白血病患者骨髓單個核細(xì)胞(BMNC)來源的樹突狀細(xì)胞(DC)成熟過程中,研究其是否可以增加DEX表面功能分子的表達(dá)水平。 方法: 分離急性髓細(xì)胞白血病完全緩解期(AML-CR)患者骨髓中的單個核細(xì)胞,采用含有重組人粒細(xì)
2、胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rHuGM-CSF)和重組人白介素-4(rHuIL-4)的RPMI1640完全培養(yǎng)基培養(yǎng)在37℃5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至第7天,陽性對照組加常規(guī)量的脂多糖(LPS),實驗組用不同劑量的APS刺激樹突狀細(xì)胞,陰性對照組加等體積的培養(yǎng)基,36小時后用分級分離法提取培養(yǎng)上清液中的DEX,在透射電子顯微鏡(TEM)下觀察DEX的形態(tài),流式細(xì)胞儀(FCM)檢測DEX表面分子HLA-DR、CD80、CD86的表達(dá)水平。此外,
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