EGCG對(duì)低氧狀態(tài)下胃癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)CoC12構(gòu)建低氧模型，檢測(cè)沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)對(duì)低氧培養(yǎng)下人胃癌SGC7901細(xì)胞增殖、凋亡以及HIF-1α及其下游靶基因VEGF表達(dá)的影響，并對(duì)EGCG影響HIF-1α表達(dá)的機(jī)制進(jìn)行初步研究。
　　 方法：
　　 ㈠設(shè)不同濃度的CoC12組，通過(guò)MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率，RT-PCR和Western Blot檢測(cè)HIF-1α的表達(dá)。
　　 ㈡通過(guò)CoC12建立低氧模型，設(shè)

2、常氧組、低氧組及低氧加EGCG組，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡，RT-PCR和Western Blot檢測(cè)HIF-1α和VEGF的表達(dá)。
　　 ㈢通過(guò)CoC12建立低氧模型，設(shè)常氧組、低氧組及低氧加EGCG組，通過(guò)Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞中ERK1/2及p- ERK1/2的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 ㈠⑴各時(shí)間點(diǎn)，200及250μmol/L CoC12對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響較大，而150μ

3、mol/L CoC12影響相對(duì)較小。
　　 ⑵ HIF-1α mRNA在各時(shí)間點(diǎn)及各CoC12濃度組的表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　 ⑶CoC12處理48h后，HIF-1α蛋白表達(dá)最高，且表達(dá)量隨著CoC12濃度的增加而增加，200與250μmol/L CoC12組表達(dá)最高，150μmol/L組次之。
　　 ㈡⑴隨著濃度及時(shí)間的增加，EGCG可進(jìn)一步抑制低氧狀態(tài)下細(xì)胞的增殖。
　　 ⑵低氧時(shí)EGCG呈時(shí)間-劑量依

4、賴性地誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　 ⑶ EGCG可明顯抑制低氧誘導(dǎo)的HIF-1α和VEGF蛋白的表達(dá)，并下調(diào)VEGF mRNA表達(dá)，但對(duì)HIF-1α mRNA的轉(zhuǎn)錄無(wú)明顯影響。
　　 ㈢低氧時(shí)p-ERK較常氧時(shí)表達(dá)上調(diào)，而EGCG可抑制低氧時(shí)p-ERK的表達(dá)；總ERK在各組的表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.150μmol/L CoC12對(duì)細(xì)胞生存影響小，并能明顯上調(diào)細(xì)胞內(nèi)HIF-1α蛋白的表達(dá)；48h時(shí)