農(nóng)桿菌介導茄子遺傳轉(zhuǎn)化體系研究.pdf

1、茄子(solanum melongna L.)，茄科茄屬一年生草本植物，是我國一種重要經(jīng)濟類蔬菜。茄子產(chǎn)量和品質(zhì)容易受到蟲害、病害、不良環(huán)境等影響。因此，培育具有抗蟲、抗病、抗逆的茄子新品種具有重要意義。常規(guī)的育種方式是品種改良的重要手段，同時也存在選育年限長、遠源雜交不親和及種質(zhì)資源匱乏等問題。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育茄子新品種是未來主要的研究方向。
　　本研究以茄子子葉為外植體材料，探討植物激素NAA、ZT、6-BA的不同濃度與組合

2、對白撮茄子葉外植體分化的影響、比較不同基因型外植體分化能力、研究硝酸銀在外植體出芽分化中的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，白撮茄愈傷組織分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT3.0mg/L，出愈率為97％；誘導芽分化最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+ZT4.0mg/L+6-BA1.5mg/L+AgNO38.0mg/L，出芽率為82%；不同基因型外植體分化能力不同；AgNO3對外植體芽分化具有促進作用；1/2MS培養(yǎng)基生根效果較好，生根率

3、可達80%。建立了穩(wěn)定的茄子再生體系。
　　本研究還對農(nóng)桿菌介導的茄子遺傳轉(zhuǎn)化進行了初步探索，篩選抑制非轉(zhuǎn)化外植體的潮霉素濃度、抑制農(nóng)桿菌生長的特美汀濃度，研究不同預(yù)培養(yǎng)時間、菌液濃度、侵染時間對外植體轉(zhuǎn)化率的影響。結(jié)果表明：10mg/L的潮霉素可對外植體抗性芽進行有效篩選；150mg/L特美汀可以有效抑制農(nóng)桿菌污染；預(yù)培養(yǎng)2天的外植體分化效果好，轉(zhuǎn)化率為71%；菌液濃度OD600值為0.5時適宜侵染，轉(zhuǎn)化率為80%；菌液侵染時間