農(nóng)桿菌介導大豆遺傳轉化體系的優(yōu)化研究.pdf

1、大豆（Glycine max L.Merrill）起源于我國，栽培歷史悠久，品種資源豐富，是世界上主要的糧食和油料作物。由于大豆的品質和產(chǎn)量易受各種病、蟲、草害的影響，因此人們試圖利用轉基因方法對大豆進行有目的定向改變的遺傳改良，以此來改善大豆的產(chǎn)量、品質和抗逆能力。但大豆與其他作物相比，轉基因研究的主要問題是轉化率低，重復性差。
　　 農(nóng)桿菌介導法是目前大豆轉基因中發(fā)展較為成熟的方法，但尚不能滿足大豆育種和功能基因研究的需要，

2、對轉化過程中影響大豆子葉節(jié)再生的因素做進一步優(yōu)化研究具有重要的應用價值。
　　 本研究利用農(nóng)桿菌介導的子葉節(jié)轉化系統(tǒng)，將大豆光合作用相關基因GmDeg2轉入大豆，以不定芽誘導率和不定芽伸長獲得率為指標，采用四因素三水平的正交試驗設計，分別對科豐6號、徐豆10號、菜豆5號的遺傳轉化條件（侵染時間、共培養(yǎng)PH值、共培養(yǎng)時間、誘導不定芽的6-BA濃度）進行優(yōu)化分析，初步篩選出三個大豆品種的最優(yōu)遺傳轉化體系。直觀分析、Duncan多重比

3、較分析結果表明，科豐6號的最佳轉化條件是侵染時間為30 min、共培養(yǎng)pH值為5.6、共培養(yǎng)時間為3d、誘導不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導率為87.7％、不定芽伸長獲得率為33％;徐豆10號的最佳轉化條件是侵染時間為20 min、共培養(yǎng)pH值為5.4、共培養(yǎng)時間為4d、誘導不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導率為55.7％、不定芽伸長獲得率為24.3％;菜豆5號最佳轉化條件是侵染時間為30 min、

4、共培養(yǎng)pH值為5.6、共培養(yǎng)時間為3d、誘導不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導率為36.7％、不定芽伸長獲得率為11.7％。
　　 對三種基因型大豆的最佳不定芽誘導率和不定芽伸長獲得率進行單因素分差分析，得出不同大豆基因型之間的不定芽誘導率和不定芽伸長獲得率存在顯著差異，其中科豐6號最適于作大豆再生植株的供體材料，其次為徐豆10號、菜豆5號?？梢姴煌蛐痛蠖顾璧倪z傳轉化條件不一樣，在遺傳轉化中應根據(jù)不同的大