維生素A修飾黃芩素脂質(zhì)體的制備及初步細(xì)胞學(xué)研究.pdf

1、目的：制備維生素A修飾黃芩素脂質(zhì)體，進(jìn)行工藝優(yōu)化及處方驗(yàn)證，考察其理化性質(zhì)及穩(wěn)定性;以視黃醇結(jié)合蛋白受體高表達(dá)的HSC和低表達(dá)的HepG2為細(xì)胞模型，初步考察VA-BAI-L藥理效應(yīng)及作用機(jī)制。
　　方法：采用乙醚注入法制備VA-BAI-L;以黃芩素包封率及維生素A結(jié)合率為指標(biāo)，采用單因素考察及正交試驗(yàn)篩選最優(yōu)處方;以離心加速實(shí)驗(yàn)及4℃儲(chǔ)存條件下包封率與結(jié)合率的變化評(píng)價(jià)其穩(wěn)定性;采用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)考察游離黃芩素、BAI-L、

2、VA-BAI-L對(duì)細(xì)胞的增殖抑制作用以及對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，采用激光共聚焦顯微鏡觀察熒光染色BAI-L、VA-BAI-L向細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)情況。
　　結(jié)果：篩選出制備VA-BAI-L最佳處方:EPC與Ch的比例為5∶1、藥脂比為1∶25、PBS溫度為50℃、PBS pH為6.6，VA用量為7mg(VA與EPC比例為7∶75)。在此最佳工藝條件下，VA-BAI-L黃芩素平均包封率為76.75％，VA平均結(jié)合率為64.77％，平均粒徑366.2

3、nm; MTT結(jié)果顯示VA-BAI-L對(duì)HSC抑制作用明顯快于BAI-L，24h抑制率明顯高于陽(yáng)性對(duì)照秋水仙堿、游離BAI及BAI-L，而對(duì)于HepG2抑制率則與BAI-L無(wú)明顯差異;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡，24h開(kāi)始VA-BAI-L組HSC細(xì)胞凋亡率明顯高于其他三組，與MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致;激光共聚焦掃描結(jié)果顯示，VA-BAI-L作用于HSC4h即呈現(xiàn)較明顯熒光，24h熒光強(qiáng)度達(dá)到最大，顯著高于其它三組。
　　結(jié)論：采用葡聚糖凝膠