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1、目的: 檢測(cè)并分析MMP10基因及其蛋白在早孕小鼠子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)及分布規(guī)律,探討其作用機(jī)理,為探索胚泡著床機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。 方法: 1、建立妊娠3、4、5、6、7天NIH小鼠模型,分別記為d3、d4、d5、d6、d7。收集d3、d4、d5、d6、d7小鼠子宮內(nèi)膜,以未孕鼠(d0)子宮內(nèi)膜作對(duì)照; 2、采用RT-PCR和原位雜交技術(shù)測(cè)定MMP10mRNA在不同孕期小鼠子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)水
2、平; 3、采用Western blotting和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)MMP10蛋白在不同孕期小鼠子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)水平。 結(jié)果: 1、MMP10基因和蛋白在未孕和早孕小鼠的子宮內(nèi)膜組織均有表達(dá),早孕組顯著高于未孕組。(P<0.05)2、RT-PCR目的基因擴(kuò)增片段大小與預(yù)期值(210bp)相同,MMP10mRNA在早孕組中的表達(dá)較未孕組顯著增加(P<0.05),且表達(dá)量從著床前期到著床后期逐漸增強(qiáng),其中d6、d7
3、表達(dá)最強(qiáng),與其它妊娠各期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3、原位雜交顯示結(jié)果與 RT-PCR 結(jié)果基本一致。雜交陽(yáng)性信號(hào)主要定位于間質(zhì)細(xì)胞的胞漿中,為紫藍(lán)色細(xì)砂樣至黑紫色粗顆粒狀。 4、IHC顯示MMP10在早孕組中的表達(dá)較未孕組顯著增加(P<0.05),且表達(dá)量從著床前期到著床后期逐漸增強(qiáng),其中d6、d7表達(dá)最強(qiáng),與其它妊娠各期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MMP10在間質(zhì)細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞和腔上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)均可
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