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1、目的:研究大鼠急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面愈合過(guò)程中相關(guān)凋亡基因Bcl-2、Bax和P53表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化,探討急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面難以愈合的機(jī)制,為臨床治療提供一定的理論依據(jù)。
方法:雌性SD清潔級(jí)大鼠54只,隨機(jī)分為3組。照射組,n=24,直線加速器產(chǎn)生的β射線(45Gy)單次照射大鼠臀部皮膚40mmx30mm,建立急性深Ⅱ度β射線皮膚損傷動(dòng)物模型;燙傷組,n=24,以直徑為25mm的恒溫電烙鐵,溫度80℃,時(shí)間8秒,建立大
2、鼠深Ⅱ度熱力燙傷動(dòng)物模型,作為普通燙傷對(duì)照;對(duì)照組,n=6,正常大鼠。取不同時(shí)期皮膚創(chuàng)面組織,采用免疫組織化學(xué)、透射電鏡、原位末端標(biāo)記(TUNEL)檢測(cè)等方法,觀察不同時(shí)相點(diǎn)各組大鼠創(chuàng)面局部凋亡變化及相關(guān)凋亡基因Bcl-2、Bax和P53的變化。
結(jié)果:
①照射組大鼠照射后2周開始脫毛,3周局部皮膚出現(xiàn)紅腫、水皰,4周出現(xiàn)創(chuàng)面,且逐漸增大,5周創(chuàng)面不再增大。燙傷組創(chuàng)面呈深Ⅱ度。
②TUNEL染色
3、結(jié)果顯示:照射組大鼠創(chuàng)面出現(xiàn)后0、1、2、3周的積分吸光度(IA)值明顯高于燙傷組,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
③免疫組化顯示:照射組創(chuàng)面出現(xiàn)后0、1、2、3周Bax、P53的積分吸光度(IA)值明顯高于燙傷組,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而燙傷組Bcl-2的積分吸光度(IA)值明顯高于燙傷組,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
④在β射線皮膚損傷創(chuàng)面愈合過(guò)程中,隨著細(xì)胞凋亡的增加,
4、Bax蛋白的表達(dá)明顯增強(qiáng),并且與細(xì)胞凋亡發(fā)生頻度具有良好的相應(yīng)關(guān)系;而Bcl-2蛋白水平在細(xì)胞凋亡達(dá)高峰時(shí)呈明顯下降趨勢(shì),當(dāng)?shù)蛲雒黠@下降時(shí),Bcl-2蛋白表達(dá)增加,并逐漸恢復(fù)其正常水平;P53蛋白在β射線皮膚損傷創(chuàng)面發(fā)生發(fā)展過(guò)程中均處于高表達(dá)狀態(tài)。
結(jié)論:
①急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面細(xì)胞凋亡出現(xiàn)較早、頻度較高、消失推遲,可能是導(dǎo)致創(chuàng)面難以愈合的重要因?yàn)橹弧?br> ②大鼠急性β射線皮膚損傷創(chuàng)面愈合過(guò)程中
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