脂多糖作用于人蛻膜細(xì)胞后IL-1β的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:通過(guò)體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞，經(jīng)不同濃度脂多糖(LPS)作用后，研究蛻膜細(xì)胞中的炎性因子IL-1β的表達(dá)差異，以探討LPS與IL-1β對(duì)自然流產(chǎn)的影響及發(fā)病機(jī)理。
　　 方法:收集正常早孕期人工流產(chǎn)術(shù)中的蛻膜組織，進(jìn)行體外原代細(xì)胞培養(yǎng)，用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)胎盤泌乳素鑒定蛻膜基質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)蛻膜細(xì)胞培養(yǎng)至4、5代后將其分成5組，分別加入含有不同濃度脂多糖的培基使其終濃度分別(0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/m

2、l、200ng/ml)處理細(xì)胞24小時(shí)后，依次分為對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組。1.通過(guò)激光共聚焦-免疫熒光技術(shù)檢測(cè)IL-1β蛋白在蛻膜細(xì)胞中的表達(dá)2.采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)各組中IL-1β mRNA的表達(dá)水平，分析各組間的表達(dá)有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果:1.成功培養(yǎng)人原代蛻膜細(xì)胞，經(jīng)免疫熒光檢測(cè)蛻膜細(xì)胞中的胎盤泌乳素，結(jié)果顯示其陽(yáng)性率為95％。2.通過(guò)激光共聚焦-免疫熒光染色技術(shù)

3、檢測(cè)各組人蛻膜細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核中均有IL-1β蛋白表達(dá)，且加入不同濃度LPS后各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，IL-1β表達(dá)差異顯著，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.不同濃度LPS作用于蛻膜細(xì)胞后，各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，IL-1β mRNA表達(dá)有顯著差異，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且隨著LPS濃度的增加，IL-1β表達(dá)逐漸增強(qiáng)。
　　 結(jié)論:
　　 1.LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后，IL-Iβ的蛋白表達(dá)增加，且隨著L