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1、目的：研究糞腸球菌脂磷壁酸(LTA)作用于人牙周膜成纖維細(xì)胞(,HPDLCs)后,細(xì)胞表面TLR2表達(dá)及分泌IL-1β的改變,探討糞腸球菌對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞表達(dá)炎癥相關(guān)因子的影響。
方法：⑴組織塊培養(yǎng)法對(duì)HPDLCs進(jìn)行體外培養(yǎng)、傳代及鑒定。⑵流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)0.1、1、10μg/ml糞腸球菌脂磷壁酸(E.faecalis,LTA)作用于HPDLCs24小時(shí)后,細(xì)胞表面Toll樣受體2(Toll likereceptor2
2、,TLR2)表達(dá)水平的改變,并采用相應(yīng)濃度的大腸桿菌內(nèi)毒素(Escherichia coli Lipopolysaccharide,E.coli LPS)作為對(duì)照。⑶ELISA檢測(cè)0.1、1、10μg/ml糞腸球菌脂磷壁酸作用HPDLCs12、24、48h后,IL-1β的分泌情況；用anti-TLR2單克隆抗體預(yù)處理HPDLCs,觀察1μg/ml LTA作用24h后,其IL-1β的分泌水平,并采用相應(yīng)濃度的E.coli LPS作為對(duì)照。
3、
結(jié)果：①與對(duì)照組相比,E.faecalis LTA可致HPDLCs表達(dá)TLR2上升(P＜0.05),且呈E.faecalis LTA濃度依賴性。②與對(duì)照組相比,E.faecalis LTA可致HPDLCs分泌IL-1β增加(P＜0.05),且48小時(shí)內(nèi)呈上升趨勢(shì),具有時(shí)間及E.faecalis LTA濃度依賴性。③anti-TLR2單克隆抗體對(duì)E.faecalis LTA誘導(dǎo)HPDLCs分泌IL-1β增多可能具有封閉作用
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